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鹅细小病毒VP3基因在昆虫杆状病毒表达系统中的表达
引用本文:王志强,李洪彬,杨旭东,黄宇翔,邹跃,张军,刘力威. 鹅细小病毒VP3基因在昆虫杆状病毒表达系统中的表达[J]. 中国畜牧兽医, 2014, 41(9): 52-55
作者姓名:王志强  李洪彬  杨旭东  黄宇翔  邹跃  张军  刘力威
作者单位:(黑龙江省兽医科学研究所,黑龙江齐齐哈尔 161006)
基金项目:黑龙江省财政厅省属科研院所自拟专项基金。
摘    要:为真核表达鹅细小病毒(GPV)融合蛋白VP3基因,本研究通过PCR扩增GPV FY89株VP3基因,并将其克隆至杆状病毒转移载体pFastBac/HBM-TOPO中,经双酶切、PCR及测序鉴定正确后,转化感受态细胞DH10Bac,提取重组杆状病毒穿梭质粒rBacmid-VP3,将经PCR鉴定正确的rBacmid-VP3转染Sf9昆虫细胞,连续传代后,细胞病变明显。SDS-PAGE分析结果表明成功表达了分子质量约为61 ku的VP3蛋白;Western blotting分析结果表明重组VP3蛋白具有良好的抗原性。

关 键 词:鹅细小病毒  VP3基因  杆状病毒表达系统  

Expression of Goose Parvovirus VP3 Gene in Baculovirus Expression System
WANG Zhi-qiang,LI Hong-bin,YANG Xu-dong,HUANG Yu-xiang,ZOU Yue,ZHANG Jun,LIU Li-wei. Expression of Goose Parvovirus VP3 Gene in Baculovirus Expression System[J]. China Animal Husbandry & Veterinary Medicine, 2014, 41(9): 52-55
Authors:WANG Zhi-qiang  LI Hong-bin  YANG Xu-dong  HUANG Yu-xiang  ZOU Yue  ZHANG Jun  LIU Li-wei
Affiliation:(Veterinary Science Research Institute of Heilongjiang Province,Qiqihar 161006,China)
Abstract:The fusion VP3 gene sequence of goose parvovirus (GPV) was amplified by PCR using a pair of specific primers from GPV FY89 strain.The PCR product was cloned into pFastBac/HBM-TOPO vector and transformed into DH10Bac cells.Recombinant Bacmid-VP3 was transfected into Sf9 insect cells,and a fusion protein about 61 ku was expressed and identified by SDS-PAGE analysis.The antigenicity of the recombinant VP3 protein was confirmed by Western blotting.
Keywords:goose parvovirus (GPV)  VP3 gene  baculovirus expression system  
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