柽柳cpSSR-PCR反应体系的建立和优化 |
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引用本文: | 张如华,张连梅. 柽柳cpSSR-PCR反应体系的建立和优化[J]. 安徽农业科学, 2019, 47(9): 105-107 |
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作者姓名: | 张如华 张连梅 |
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作者单位: | 临沂大学生命科学学院,山东临沂,276005;临沂大学图书馆,山东临沂,276005 |
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摘 要: | [目的]建立并优化柽柳cpSSR-PCR反应体系和反应条件。[方法]对影响PCR反应的5个变量(Mg~(2+)浓度、dNTPs浓度、Taq DNA聚合酶浓度、引物浓度、模板DNA浓度)进行L_(16)(4~5)正交试验设计,并对引物退火温度进行梯度筛选。[结果]最优反应体系:Mg~(2+) 2.0 mmol/L、dNTPs 0.125 mmol/L、Taq DNA聚合酶0.25 U、引物0.25μmol/L、模板DNA 20 ng,共10μL。反应程序:94℃预变性4 min;94℃30 s,引物退火温度30 s,72℃30 s,30个循环;72℃延伸10 min。[结论]该反应体系成功扩增1个柽柳天然群体的23个个体,为柽柳群体扩散路线的确定奠定基础。
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关 键 词: | 柽柳 叶绿体微卫星 反应体系 正交试验 |
Establishment and Optimization of cpSSR-PCR Reaction System of Tamarix chinensis |
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Abstract: | |
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Keywords: | |
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