| Cdh1和Num1过表达菌株的构建 |
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| 引用本文： | 李巧巧,庞文颖,海力,唐仙英.Cdh1和Num1过表达菌株的构建[J].安徽农业科学,2019,47(10). |
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| 作者姓名： | 李巧巧 庞文颖 海力 唐仙英 |
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| 作者单位： | 中南民族大学生命科学学院,武陵山区特色资源植物种质保护与利用湖北省重点实验室,生物技术国家民委重点实验室,湖北武汉430074;中南民族大学生命科学学院,武陵山区特色资源植物种质保护与利用湖北省重点实验室,生物技术国家民委重点实验室,湖北武汉430074;中南民族大学生命科学学院,武陵山区特色资源植物种质保护与利用湖北省重点实验室,生物技术国家民委重点实验室,湖北武汉430074;中南民族大学生命科学学院,武陵山区特色资源植物种质保护与利用湖北省重点实验室,生物技术国家民委重点实验室,湖北武汉430074 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;国家自然科学基金;中南民族大学基本科研业务费专项 |
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| 摘 要： | 目的]研究Cdh1和Num1之间是否存在相互作用,构建用于Cdh1和Num1免疫共沉淀试验的过表达菌株。方法]首先在酵母菌株YWL630中用GAL1和3HA对CDH1进行标记,构建GAL1-3HA-CDH1 NUM1-GFP菌株,再利用酵母四分体解离的方法使菌株YWL63和YWL490分别与该菌株杂交并进行四分体解离,从而得到所需菌株。结果]成功构建不同基因型和配型的重组酵母菌株,其中YT52成功过表达了约340 kD的Num1,YT53成功过表达了340 kD的Num1和75 kD的Cdh1,YT57成功过表达了75 kD的Cdh1。结论]经过同源重组的方法成功标记CDH1并诱导蛋白过表达,通过酵母四分体解离的方法构建用于Cdh1和Num1互作试验的过表达菌株,为揭示APC/C是否介导Num1的降解及机制奠定基础。
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| 关 键 词： | 过表达 酵母四分体解离 Cdh1 Num1 |
Construction of Cdh1 and Num1 Overexpressing Strains |
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