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苋色藜NDR1基因抗病毒特性初步研究
引用本文:龚前园,张超,吴华年,李为民,张永强. 苋色藜NDR1基因抗病毒特性初步研究[J]. 中国农业科技导报, 2014, 16(6): 36-43. DOI: 10.13304/j.nykjdb.2014.059
作者姓名:龚前园  张超  吴华年  李为民  张永强
作者单位:(中国农业科学院生物技术研究所, 北京 100081)
基金项目:国家转基因生物新品种培育重大专项(2011ZX08001|002;2011ZX08001|004);国家自然基金项目(31371917)资助。
摘    要:以抗病毒植物苋色藜为材料,克隆拟南芥NDR1的同源基因,确定其亚细胞定位及该基因表达和抗病毒特性分析,为转基因抗病育种奠定技术基础。根据苋色藜转录组测序分析结果,采用RT|PCR克隆获得两个与拟南芥同源的NDR1基因,分别命名为CaNDR1a和CaNDR1b,并通过实时定量PCR分析病毒侵染后基因的表达情况;构建植物瞬时表达载体,发现CaNDR1a和CaNDR1b定位于细胞膜;构建CaNDR1a和CaNDR1b植物表达载体,遗传转化获得转基因烟草,经酶联免疫吸附测定(ELISA)分析T1代植株对烟草花叶病毒(TMV)和黄瓜花叶病毒(CMV)的抗性。生物信息学分析揭示CaNDR1a和CaNDR1b是NDR1的同源基因。CaNDR1a和CaNDR1b在苋色藜接种TMV和CMV后显著上调表达。CaNDR1a和CaNDR1b定位于细胞膜上,并且病毒对CaNDR1a和CaNDR1b的胞内定位没有影响。ELISA结果显示部分转基因株系对TMV和CMV的抗性增加。初步表明CaNDR1a和CaNDR1b是拟南芥NDR1的功能性同源基因,参与植物对病毒的内源免疫反应。

关 键 词:NDR1  转基因烟草  烟草花叶病毒  黄瓜花叶病毒  

Preliminary Research on Resistance to Virus of Chenopodium amaranticolor NDR1
GONG Qian|yuan,ZHANG Chao,WU Hua|nian,LI Wei|min,ZHANG Yong|qiang. Preliminary Research on Resistance to Virus of Chenopodium amaranticolor NDR1[J]. Journal of Agricultural Science and Technology, 2014, 16(6): 36-43. DOI: 10.13304/j.nykjdb.2014.059
Authors:GONG Qian|yuan  ZHANG Chao  WU Hua|nian  LI Wei|min  ZHANG Yong|qiang
Affiliation:(Biotechnology Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China)
Abstract:
Keywords:NDR1   transgenic tobacco  tobacco mosaic virus  cucumber mosaic virus  
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