Bta-miR-677靶向线粒体抗病毒信号蛋白影响Ⅰ型干扰素的生成

旨在探究bta-miR-677调控Ⅰ型干扰素（IFN）表达的分子机制。将bta-miR-677转染MDBK细胞，检测Ⅰ型IFN和干扰素刺激基因（ISGs）的转录水平；随后通过TargetScan预测bta-miR-677的靶基因，双荧光素酶报告基因系统、qRT-PCR和Western blot验证bta-miR-677的靶基因；利用siRNA敲减验证靶基因对Ⅰ型IFN转录的影响。结果显示，过表达bta-miR-677组IFN-α/β的转录水平高于对照组2~4倍（P<0.001），随后检测到6种ISGs（IFI6、OAS1Y、OAS1Z、RSAD2、MX1和MX2）转录量上调2~16倍（P<0.01或P<0.001）；反之，抑制表达bta-miR-677组IFN-α/β转录量下调（P<0.01或P<0.05），同时IFI6、OAS1Y、OAS1Z、RSAD2、MX1和MX2转录量下调（P<0.05或P<0.01）。经TargetScan预测和双荧光素酶报告基因系统、qRT-PCR和Western blot检测显示，bta-miR-677可靶向结合线粒体抗病毒信号蛋白（MAVS）的3'-UTR，抑制MAVS蛋白的表达；MAVS基因敲减后发现，IFN-α、IFN-β和6种ISGs转录量上调。研究结果表明，bta-miR-677通过靶向MAVS上调IFN-α/β转录水平，进而提高ISGs的表达量，为基于bta-miR-677研制抗病毒药物提供了重要资料。