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多重PCR快速检测猪伪狂犬病病毒、猪圆环病毒2型方法的建立
作者姓名:谢燕婷
作者单位:厦门银祥集团 肉食品安全生产技术国家重点实验室 福建厦门 361000
基金项目:厦门市科技计划项目“肉品安全快速基因检测方法的研究”(3502Z20110001)资助。
摘    要:根据GenBank上猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)的已知序列,利用Primer Premier 5.0及DNAstar软件对上述病毒基因保守区进行引物设计,选出扩增序列为PRV gB基因373 bp、PCV2 ORF2基因430 bp两对引物。在优化单项PCR反应条件基础上,建立了PRV-PCV2两重PCR检测方法。敏感性及特异性试验结果显示,该mPCR对2种病毒的核酸检测可至1.47×10-6~1.62×10-6 ng,而对灭菌双蒸水、猪细小病毒(PPV)猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)多重PCR的扩增结果均为阴性,作为临床上猪伪狂犬病和猪圆环病毒2型感染的病原学快速诊断方法具有可行性。

关 键 词:多重PCR方法  猪伪狂犬病病毒  猪圆环病毒2型
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