| 紫椴ISSR-PCR反应体系的建立与优化 |
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| 引用本文： | 穆立蔷,刘赢男,冯富娟,杨国亭. 紫椴ISSR-PCR反应体系的建立与优化[J]. 林业科学, 2006, 42(6): 26-31 |
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| 作者姓名： | 穆立蔷 刘赢男 冯富娟 杨国亭 |
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| 作者单位： | 东北林业大学,哈尔滨,150040;东北林业大学,哈尔滨,150040;东北林业大学,哈尔滨,150040;东北林业大学,哈尔滨,150040 |
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| 摘 要： | 分别采用单因子试验和正交设计2种方法对影响紫椴ISSR-PCR反应体系的4个因素(Taq酶,Mg2 ,dNTP,引物)在3个水平上进行优化试验.正交设计选用L9(34)方案,采用直观分析法获得影响因素最佳反应水平.单因子试验分别研究各因素对ISSR-PCR反应的影响情况,找出最佳反应水平.2种方法所得影响因素最佳水平存在差异,通过综合比较与分析,最终建立了紫椴ISSR-PCR的最佳反应体系:在20μL的反应体系中,Taq酶1.0U,Mg2 2.0 mmol·L-1,dNTP 0.20 mmol·L-1,引物0.4μmol·L-1,1×PCR buffer,30 ng模板DNA.在此基础上筛选出14个扩增稳定、多态性丰富的ISSR引物,并通过梯度PCR试验,确定引物最佳退火温度.
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| 关 键 词： | 紫椴 ISSR-PCR 正交设计 单因子试验 梯度PCR |
| 文章编号： | 1001-7488(2006)06-0026-06 |
| 收稿时间： | 2005-10-20 |
| 修稿时间： | 2005-10-20 |
Establishment and Optimization of ISSR-PCR Reaction System for Tilia amurensis |
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| Mu Liqiang,Liu Yingnan,Feng Fujuan,Yang Guoting. Establishment and Optimization of ISSR-PCR Reaction System for Tilia amurensis[J]. Scientia Silvae Sinicae, 2006, 42(6): 26-31 |
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| Authors: | Mu Liqiang Liu Yingnan Feng Fujuan Yang Guoting |
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| Affiliation: | Northeast Forestry University Harbin 150040 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | ISSR-PCR |
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