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绵羊肺炎支原体和溶血性曼氏杆菌双重PCR检测方法的建立及应用
引用本文:冯旭飞,王远微,李定霏,杨发龙.绵羊肺炎支原体和溶血性曼氏杆菌双重PCR检测方法的建立及应用[J].中国预防兽医学报,2014,36(10).
作者姓名:冯旭飞  王远微  李定霏  杨发龙
作者单位:1. 西南民族大学 生命科学与技术学院,四川成都,610041
2. 成都市水生动物检疫检验站,四川成都,610071
基金项目:四川省杰出青年学术技术带头人培育计划
摘    要:为建立同时检测绵羊肺炎支原体(MO)和溶血性曼氏杆菌(Mh)的方法,本研究根据MO的hsp70基因和Mh的gcp基因分别设计引物,建立了同时检测这两种病原的双重PCR检测方法.实验结果显示该方法能够特异性的扩增MO (135 bp)和Mh (227 bp) DNA片段,其最低检出量分别为2.06×103拷贝/μL和6.37 c fu/mL,与单一PCR相同.该方法对常见的致病菌无交叉反应.对临床样本的检测结果显示MO和Mh的检出率分别为56.25%和52.50%,与单独PCR符合率为100%.研究结果表明,本研究所建立的双重PCR检测方法具有特异性强、敏感性高等特点,为临床上MO和Mh混合感染的快速检测、鉴定以及流行病学调查提供了方便、快捷、准确的方法.

关 键 词:绵羊肺炎支原体  溶血性曼氏杆菌  双重PCR

Development of a duplex PCR assay for Mycoplasma ovipneumoniae and Mannheimia haemolytica
FENG Xu-fei,WANG Yuan-wei,LI Ding-fei,YANG Fa-long.Development of a duplex PCR assay for Mycoplasma ovipneumoniae and Mannheimia haemolytica[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2014,36(10).
Authors:FENG Xu-fei  WANG Yuan-wei  LI Ding-fei  YANG Fa-long
Abstract:
Keywords:Mycoplasma ovipneumoniae  Mannheimia haemolytica  duplex PCR
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