绵羊β2-肾上腺素能受体基因(β2-AR)的克隆及其第二细胞外环在大肠杆菌中的表达 |
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引用本文: | 张慧玲,陈小平,杨祥,陈勇,韩冰,王子荣.绵羊β2-肾上腺素能受体基因(β2-AR)的克隆及其第二细胞外环在大肠杆菌中的表达[J].农业生物技术学报,2010,18(5). |
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作者姓名: | 张慧玲 陈小平 杨祥 陈勇 韩冰 王子荣 |
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作者单位: | 新疆农业大学动物科学学院,乌鲁木齐,830052 |
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基金项目: | 国家自然科学基金,新疆维吾尔自治区高校科研计划 |
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摘 要: | 本研究以β2-肾上腺素能受体(β2-adrenergic receptor,β2-AR)基因的保守序列设计了1对PCR引物,通过PCR技术首次获得了萨福克、小尾寒羊和中国美利奴(新疆型)3个绵羊(Ovis aries)品种的β2-AR基因(GenBank登录号分别为EU707939、EU707940和EU707941),该基因含一个1 257 bp的开放阅读框(ORF),编码418个氨基酸残基.核苷酸序列分析显示,绵羊β2-AR基因与牛、猪、大鼠和人的相似性分别为98.4%、88.5%、84.2%和80.5%.通过基因合成技术合成了双拷贝的绵羊β2-AR第二细胞外环编码区DNA,并将其与pET32C(+)重组.重组菌以1 mmol/L IPTG诱导,通过SDS-PAGE和Western blot分析,绵羊β2-AR第二细胞外环融合蛋白在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中成功表达,表达产物分子量约为26 kD,表达水平最高占菌体总蛋白的40.3%.
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关 键 词: | 绵羊 β2-肾上腺素能受体基因(β2-AR) 克隆 原核表达 |
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