牛分枝杆菌CFP10-ESAT6融合基因的表达纯化

为了提高牛分枝杆菌单一抗原的抗原性,试验采用重叠延伸剪接技术(SOE)将CFP10和ESAT6基因通过(Gly4Ser)3接头连接,得到融合基因CFP10-ESAT6;将其克隆入pGEX-6P-1质粒,构建重组质粒pGEX-6P-1-CFP10-ESAT6;用重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导和SDS-PAGE分析,可见相应外援蛋白带;最后应用Western-blot检测融合基因。结果表明:试验成功构建携带牛分枝杆菌CFP10-ESAT6融合基因的重组质粒,其表达的融合蛋白具有牛分枝杆菌抗原性。说明CFP10-ESAT6融合蛋白可用于牛结核病感染和免疫抗体的检测,具有良好的开发和应用前景。