花生过敏蛋白分离提取及结构预测分析

花生是较常见的重要食物过敏原之一。本研究采用石油醚对花生进行脱脂处理，利用硫酸铵盐析、透析、葡聚糖凝胶（Sephadex G-150）分离纯化花生蛋白，通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）法确定花生主要蛋白分子量为15、20、35和60 ku左右，Western–Blotting免疫印迹试验确定花生过敏原性蛋白分子量为63.5 ku；通过质谱测序得到31条有效蛋白肽段，其中5条肽段的谱图数较高，占总谱图数的49.6%，分别是KLEYDPRCVYDTGAT、AFNAEFNEIRRVLLEE、DNVIDQIEKQAK、PYSPSQDPDRRDPY和QDPYSPSQDPDR，并以此推断这些肽段为花生致敏蛋白Ara h 1和Ara h 2的主要肽段过敏序列，成功运用蛋白肽段推断与之对应的蛋白质种类，为进一步明确花生过敏原的致敏机理奠定基础。但花生过敏蛋白构象结构复杂，需要通过其他手段进一步开展研究工作。