Detection of potato virus M in tubers,sprouts, and leaves of potato by the French bean test

Summary A simple French bean test was found useful in detecting potato virus M (PVM) in tubers, sprouts, and leaves of potato. Intact primary leaves of several bean cultivars were highly susceptible to the selected isolates of PVM fromKing Edward, Bintje, Fortuna, andUp-to-Date. Distinctive brown local lesions were formed 3 days after PVM inoculation. Certain factors, including leaf age, virus inactivation in sap, and relative virus infectivity in leaf and different parts of tuber, were studied by the French bean test. PVM was detectable by inoculating bean half-leaves directly with freshly cut pieces of tubers.

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Zusammenfassung Sieben aus Kanada und den Niederlanden stammende Isolate des Kartoffelvirus M (PVM) wurden in dieser Untersuchung gebraucht, um den Wert des Brechbohnen (Phaseolus vulgaris L.)-Testes für die praktische Verwendung beim Nachweis des PVM zu ermitteln. Die Inokulation erfolgte durch Abreiben jeder Blatth?lfte (nach Best?ubung mit Karborund, 600 Mesh) von voll ausgewachsenen Prim?rbl?ttern mit einem Baumwollappen, der vorher in ein Inokulum (mit 0,057M Phosphatbuffer, pH 8,5, verdünnt) getaucht worden war. Intakte Bl?tter und gepflückte Bl?tter. Die Empfindlichkeit der Prim?rbl?tter der Bohne nahm durch das Pflücken vom Stengel ab. Bohnensorten und Virusisolate. PVM-Isolate vonKing Edward, Bintje, Fortuna undUp-to-Date führten bei den folgenden Bohnensorten zu Lokall?sionen:Red Kidney, Bataaf, Prinsesco, Processor, Saxa, Walcherse Witte undWagenaars. Imuna, Noordhollandse Bruine undPinto UI 114 waren resistent gegen PVM (Tabelle 1).Alter des Blattes. Die Empf?nglichkeit der Bohnenbl?tter ?nderte mit zunehmendem Alter. Die gr?sste Empf?nglichkeit wurde 11 Tage nach der Saat beiRed Kidney, Bataaf, Processor undWalcherse Witte erreicht und 12 Tage nach des Saat beiWagenaars (Abb. 1). Verdünnungsendpunkt. PVM wurde in allen Knollenteilen bis zu einer Verdünnung von 10⁻³ entdeckt, nicht aber bei Verdünnung von 10⁻⁴, w?hrend PVM im Blatt bis zu einer Verdünnung von 10⁻⁴, aber nicht von 10⁻⁵ gefunden wurde (Tabelle 2). Langlebigkeit des Virus. Die Langlebigkeit des PVM war in den Knollenextrakten stets gr?sser (48 Std.) als in jenen von Blattextrakten (24 Std). bei 21–22°C (Abb. 2). Die Infektiosit?t von Blattmustern, tiefgefroren bei −15°C, nahm nicht stark ab, wie dies bei Saftmustern, aufbewahrt bei 22°C, der Fall war (Tabelle 3). Nachweis des PVM direkt in der Knolle. PVM wurde festgestellt in Augen, Rinde, Keim und Mark der Knollen, die w?hrend 8 Monaten bei 4°C gelagert wurden (Tabelle 4). Die Nachweisrate von 84% wurde durch direkte Inokulierung von halben Bl?ttern vonRed Kidney-Bohnen mit Knollenstücken erzielt (Tabelle 5). Daraus wurde geschlossen, der Bohnentest zur Erfassung des PVM in Knollen, Keimen und Bl?ttern der Kartoffel sei von praktischem Belang. Ferner wurde angenommen, dass der Bohnentest auch nützlich sein k?nnte bei der Auslese von Kartoffellinien bei der Untersuchung ihrer Resistenz gegen PVM und beim Auslesen von virusfreien Pflanzkartoffeln im Hinblick auf die nachfolgende Weitervermehrung.

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Résumé Dans la présente recherche, l'auteur a utilisé sept isolats du virus M de pomme de terre (PVM) provenant du Canada et de Hollande pour déterminer la valeur du test sur haricot vert (Phaseolus vulgaris L.) dans la pratique de détection du virus PVM. L'inoculation a été réalisée en frottant chaque moitié de feuilles primaires pleinement développées, poudrées avec du carborundum 600, avec un tampon de coton trempé dans l'inoculum dilué dans 0,057M, tamponné de phosphate, de pH 8,5. Feuilles de plantes intactes à feuilles détachées. Lors du sectionnement, la sensibilité des feuilles primaires de haricot diminue significativement de la tige au pétiole. Variétés de haricot et isolats de virus. Les isolats de PVM deKing Edward, Bintje, Fortuna etUp-to-Date provoquent des lésions locales chez les variétés de haricot suivantes:Red Kidney, Bataaf, Prinsesco, Processor, Saxa, Walcherse Witte etWagenaars. Imuna, Noordhollandse Bruine, etPinto UI 114 sont résistants au PVM (Tableau 1). Age de la feuille. La susceptibilité des feuilles de haricot varie avec leur age. La susceptibilité maximum au PVM est obtenue 11 jours après le semis chezRed Kidney, Bataaf, Processor etWalcherse Witte, et 12 jours chezWagenaars (Fig. 1). Point extrême de dilution du virus. PVM est détecté dans toutes les parties du tubercule jusqu'à la dilution de 10⁻³ mais non plus à la dilution 10⁻⁴, tandis que dans la feuille le PVM est détecté jusqu'à la dilution de 10⁻⁴, mais non plus à la dilution de 10⁻⁵ (Tableau 2). Longévité du virus. La longévité du PVM est toujours plus grande dans les extraits du tubercule (48 heures) que dans ceux de la feuille (24 heures) à 21–22°C (Fig. 2). L'infection d'échantillons de feuilles, gelées à −15°C, ne diminue pas fortement comme c'est le cas dans les échantillons conservés à 22°C (Tableau 3). Détection directe du PVM dans le tubercule. Le PVM se détecte dans l'oeil, la couche corticale, le germe et la mo?lle des tubercules conservés 8 mois à 4°C (Tableau 4). Le taux de détection est de 84% lorsqu'on inocule directement des demi-feuilles de haricotRed Kidney avec des fragments coupés de tubercule (Tableau 5). La conclusion est que le test sur haricot est pratique pour la détection du PVM dans les tubercules, les germes et les feuilles de pomme de terre. L'auteur suggère en outre que le test sur haricot peut être pleinement utile dans l'élimination de clones de pomme de terre lors de l'étude de la résistance au PVM, de même que dans la sélection de tubercules de pomme de terre libres de virus en vue d'une multiplication ultérieure.