| 巴马小型猪SLA-2和β2m复合体蛋白的构建及二级结构测定分析 |
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| 引用本文： | 高凤山,李新生,李云岗,方勤美,郝慧芳,夏春. 巴马小型猪SLA-2和β2m复合体蛋白的构建及二级结构测定分析[J]. 畜牧兽医学报, 2007, 38(3): 263-270 |
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| 作者姓名： | 高凤山 李新生 李云岗 方勤美 郝慧芳 夏春 |
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| 作者单位： | 1. 大连大学生物工程学院,大连,116622;中国农业大学动物医学院农业部预防兽医学重点实验室,北京,100094
2. 中国农业大学动物医学院农业部预防兽医学重点实验室,北京,100094 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(30371098) |
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| 摘 要： | 以巴马小型猪为研究材料,克隆SLA-2和β2m基因。然后采用剪接重叠延伸PCR(Splicing overlap exten-tion PCR,SOE PCR)法,将SLA-2的胞外区和β2m的成熟肽部分通过一富含甘氨酸/丝氨酸的Linker(G4S)3连接,形成SLA-2-Linker-β2m。将SLA-2-Linker-β2m在pMAL-p2X系统上表达,其融合表达蛋白分别经过West-ern-blot、纯化及Factor Xa切割,分离纯化单体蛋白。圆二色谱(Circular dichroism spectrum,CD)测定蛋白的二级结构。结果显示,重构表达的复合体融合蛋白MBP-SLA-2-(G4S)3-β2m大小为84.1 ku。切割后去除MBP的单体蛋白大小为41.6 ku。圆二色谱分析单体蛋白和融合蛋白二级结构元件α-螺旋、β-折叠、转角和随机卷曲的符合率分别达到了100%、97.3%、97.1%和97.9%,揭示重构的复合体具有正确的二级结构,可以用于体外多肽结合等研究。
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| 关 键 词： | 猪 圆二色谱 SLA-2 β2m |
| 文章编号： | 0366-6964（2007）03-0263-08 |
| 修稿时间： | 2006-06-15 |
Cloning of SLA-2 and β2m from Bama Miniature Pig and Construction of the Protein Complex |
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| GAO Feng-shan,LI Xin-sheng,LI Yun-gang,FANG Qin-mei,HAO Hui-fang,XIA Chun. Cloning of SLA-2 and β2m from Bama Miniature Pig and Construction of the Protein Complex[J]. Chinese Journal of Animal and Veterinary Sciences, 2007, 38(3): 263-270 |
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| Authors: | GAO Feng-shan LI Xin-sheng LI Yun-gang FANG Qin-mei HAO Hui-fang XIA Chun |
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| Affiliation: | 1. Bioengineering College, Dalian University, Dalian 116622, China of Preventive Veterinary Medicine of Ministry of Agriculture ,Colle China Agricultural University, Beijing 100094, 2. Key Laboratory ge of Veterinary China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | SLA-2 |
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