| 半滑舌鳎ＨＩＦ １α基因的原核表达与多克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 王资生,齐志涛,张启焕,仇 明,赵卫红.半滑舌鳎ＨＩＦ １α基因的原核表达与多克隆抗体的制备[J].水生态学杂志,2012,33(6):103-108. |
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| 作者姓名： | 王资生 齐志涛 张启焕 仇 明 赵卫红 |
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| 作者单位： | 1. 盐城工学院江苏省沿海池塘养殖生态重点实验室,江苏盐城224051;盐城工学院化学与生物工程学院,江苏盐城224051
2. 盐城工学院江苏省沿海池塘养殖生态重点实验室,江苏盐城,224051 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（31101887），江苏省自然科学基金（BK2011418）；江苏省省属高校自然科学基金项目（10KJB240001） |
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| 摘 要： | 根据半滑舌鳎HIF-1αcDNA序列设计特异性引物,从半滑舌鳎肝脏中扩增HIF-1d用于表达片段,连接至载体pMD18-T,分别以KpnⅠ和XholⅠ对含有目的基因的质粒和pET-30a进行酶切,连接并转化大肠杆菌BL21中,构建了半滑舌鳎HIF-1α原核蛋白表达载体.以IPTG进行诱导表达.表达产物通过Ni-NTA亲和层析进行纯化,免疫接种日本大耳白兔,制备了兔抗HIF-1α多克隆抗体.Western blot检测显示该多克隆抗体具有较好的特异性,能够与HIF-1α表达宿主菌蛋白特异性结合.
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| 关 键 词： | 半滑舌鳎 HIF-1α 原核表达 蛋白纯化 Western blot |
| 收稿时间： | 2012/9/28 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2012/11/6 0:00:00 |
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