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小麦抗白粉病SSH-cDNA文库中差异基因的表达模式
引用本文:吴金华,胡银岗,王新茹,张宏,王长有,王秋英,吉万全.小麦抗白粉病SSH-cDNA文库中差异基因的表达模式[J].作物学报,2008,34(12):2121-2125.
作者姓名:吴金华  胡银岗  王新茹  张宏  王长有  王秋英  吉万全
作者单位:1.西北农林科技大学农学院 / 陕西省农业分子生物学重点实验室 / 国家小麦改良中心杨凌分中心,陕西杨凌712100;2 河北农业大学农学院,河北保定071001;3 陕西省农药管理检定所,陕西西安710003
基金项目:国家重点基础研究发展计划(973计划)前期项目(2006CB708208);国家科技支撑计划项目(2006BAD01A02)
摘    要:为了解白粉菌诱导下抗白粉病小麦的抗病机制,构建了白粉菌接种初期的抑制性消减杂交cDNA(SSH-cDNA)文库。从中随机挑取140个阳性克隆进行测序,去除冗余序列和重复序列后,得到94条EST,利用NCBI的BLAST在线序列比对工具对GenBank的蛋白质数据库进行同源性比对及功能分类。结果表明,49个EST与已知功能蛋白同源性较高,主要涉及初级代谢(2%)、能量代谢(24%)、细胞结构(2%)、转录(2%)、蛋白质合成加工与储藏(16%)、转运(4%)、信号转导(4%)和抗病与防御(30%)。经文库比较,筛选出与病程相关蛋白基因同源的EST(Z25-1)和与谷胱甘肽硫转移酶同源的EST(Z440-1),GenBank登录号为EX567369和EX567360。以其EST序列为依据设计引物,通过RT-PCR分析它们在白粉菌诱导下的表达模式,结果该2基因表达存在明显差异。其中,Z25-1在未接种白粉菌时具有一定的表达量,白粉菌侵染后表达量开始上升,侵染72 h时表达量最高,然后下降;Z440-1在未接种时也具有一定的表达量,但在接种初期表达微弱,甚至不表达,24 h后表达开始上升,到72 h时达最高,然后下降。本研究表明,病程相关蛋白和谷胱甘肽硫转移酶属于诱导型表达基因,且参与白粉病抗病反应,在白粉菌诱导72 h时表达量最高。

关 键 词:小麦  白粉病  抑制性消减杂交(SSH)  反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)  
收稿时间:2008-03-07
修稿时间:2008-06-05

Expression Pattern of Special Genes Resistant to Powdery Mildew (Blumeria graminis f. sp. tritici) in SSH-cDNA Library of Wheat
WU Jin-Hua,HU Yin-Gang,WANG Xin-Ru,ZHANG Hong,WANG Chang-You,WANG Qiu-Ying,JI Wan-Quan.Expression Pattern of Special Genes Resistant to Powdery Mildew (Blumeria graminis f. sp. tritici) in SSH-cDNA Library of Wheat[J].Acta Agronomica Sinica,2008,34(12):2121-2125.
Authors:WU Jin-Hua  HU Yin-Gang  WANG Xin-Ru  ZHANG Hong  WANG Chang-You  WANG Qiu-Ying  JI Wan-Quan
Institution:1.College of Agronomy, Northwest A&F University / Yangling Branch of China Wheat Improvement Center / Shaanxi Provincial Key Laboratory of Molecular Biology for Agriculture, Yangling 712100, Shaanxi;2.College of Agronomy, Agricultural University of Hebei, Baoding 071001, Hebei;3.Institute for the Control of Agrochemicals of Shaanxi Province, Xi’an 710003, Shaanxi, China
Abstract:
Keywords:
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