| 用正交设计法优化辣椒ISSR-PCR反应体系 |
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| 引用本文： | 张卿哲,孟金贵,张应华,杨正安,许彬. 用正交设计法优化辣椒ISSR-PCR反应体系[J]. 西南农业学报, 2011, 24(3) |
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| 作者姓名： | 张卿哲 孟金贵 张应华 杨正安 许彬 |
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| 作者单位： | 云南农业大学园林园艺学院，云南昆明，650201 |
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| 基金项目： | 云南省自然科学基金(2008CD136) |
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| 摘 要： | 采用正交设计L16(45)对辣椒ISSR-PCR反应体系的5个因素(Taq酶、Mg2+、模板DNA、dNTPs、引物浓度)在4水平上进行优化试验。结果表明,最佳反应体系为:在25μl总反应体系中,含1×PCR缓冲液、2.0 mmol Mg2+、1.5 unitTaqDNA聚合酶、0.25 mmoldNTP、0.48μmol引物、120 ng模扳DNA。扩增程序为:95℃预变性5 min;94℃变性45 s,51℃退火1 min,72℃延伸2min,进行38个循环;最后72℃延伸10 min。新优化的辣椒ISSR-PCR反应体系和程序有很好的重复性和稳定性。此研究为今后利用ISSR技术对辣椒进行种质资源分类、遗传图谱构建和基因定位提供了一个较理想的应用方案。
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| 关 键 词： | 辣椒 ISSR 反应体系 正交设计 优化 |
Optimization for ISSR Reaction System of Pepper by Orthogonal Design |
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| ZHANG Qing-zhe,MENG Jin-gui,ZANG Ying-hua,YANG Zheng-an,XU Bin. Optimization for ISSR Reaction System of Pepper by Orthogonal Design[J]. Southwest China Journal of Agricultural Sciences, 2011, 24(3) |
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| Authors: | ZHANG Qing-zhe MENG Jin-gui ZANG Ying-hua YANG Zheng-an XU Bin |
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| Affiliation: | ZHANG Qing-zhe,MENG Jin-gui,ZANG Ying-hua,YANG Zheng-an,XU Bin(College of Garden and Horticulture,Yunnan Agricultural University,Yunnan Kunming 650201,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Pepper ISSR Reaction system Orthogonal design Optimization |
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