| 结缕草属植物SRAP－PCR体系的建立和优化 |
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| 引用本文： | 薛丹丹,郑轶琦,王志勇,郭海林,陈宣,刘建秀.结缕草属植物SRAP－PCR体系的建立和优化[J].草业学报,2008,17(6):93-101. |
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| 作者姓名： | 薛丹丹 郑轶琦 王志勇 郭海林 陈宣 刘建秀 |
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| 作者单位： | 南京农业大学园艺学院,江苏,南京,210095;江苏省中国科学院植物研究所,江苏,南京,210014;江苏省中国科学院植物研究所,江苏,南京,210014 |
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| 基金项目： | 江苏省科技攻关计划
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国家自然科学基金
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江苏省高技术研究发展计划项目
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| 摘 要： | 以ＳＤＳ法提取的结缕草属植物叶片ＤＮＡ 为模板，分别采用单因子试验和正交设计试验２种方法，对影响结缕草属植物ＳＲＡＰ－ＰＣＲ 的MG2+ 、ｄＮＴＰ、引物、ＴａｑＤＮＡ 聚合酶和模板ＤＮＡ 五个因素进行优化试验。单因子试验分别研究各因素在多水平条件下对ＳＲＡＰ－ＰＣＲ 反应体系的影响，得到最佳反应条件。正交设计采用Ｌ１６（４５）方案，综合考虑各因素间的相互作用，通过直观分析法获得各影响因素的最佳反应水平。根据４对引物对６ 份结缕草属植物材料扩增结果的验证比较，２种方法所获得的最佳反应体系存在一定的差异。通过综合比较和分析２种方法的优化体系扩增出的条带数、多态性条带数及多态性比率，最终建立了结缕草属植物ＳＲＡＰ－ＰＣＲ 的最佳反应体系：MG2+２．００ｍｍｏｌ／Ｌ、ｄＮＴＰ２２０μｍｏｌ／Ｌ、引物０．２０μｍｏｌ／Ｌ、ＴａｑＤＮＡ 聚合酶０．５０Ｕ、模板ＤＮＡ６０ｎｇ、２μＬ１０×ｂｕｆｆｅｒ，总体积为２０μＬ。这一优化体系的建立为今后利用ＳＲＡＰ标记技术进行结缕草属植物遗传多样性、种质鉴定、遗传连锁图谱及亲缘关系分析等方面的研究提供了科学的依据。
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| 关 键 词： | 结缕草属植物 SRAP标记 单因子试验 正交设计 体系优化 |
| 收稿时间： | 1900-01-01; |
Establishment and optimization of SRAP-PCR reaction system for Zoysia |
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| XUE Dan-dan,ZHENG Yi-qi,WANG Zhi-yong,GUO Hai-lin,CHEN Xuan,LIU Jian-xiu.Establishment and optimization of SRAP-PCR reaction system for Zoysia[J].Acta Prataculturae Sinica,2008,17(6):93-101. |
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| Authors: | XUE Dan-dan ZHENG Yi-qi WANG Zhi-yong GUO Hai-lin CHEN Xuan LIU Jian-xiu |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Zoysia SRAP markers single factor test orthogonal design optimized system |
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