抗猪IgG单克隆抗体的研制 |
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作者姓名: | 吴胜昔 蔡家利 胡仁建 |
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作者单位: | 重庆工学院生物工程学院,重庆400050 |
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基金项目: | 重庆市自然科学基金资助项目(CSTC,2006BB5402). |
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摘 要: | 采用饱和硫酸铵盐析、离子交换柱层析技术从猪血清中提纯IgG.经SDS-PAGE电泳鉴定,纯化的IgG达到电泳纯.以此纯化的IgG,采用长程免疫法免疫BALB/c小鼠,取4次免疫后的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞用PEG-1500进行细胞融合,融合率为90.3%.建立间接ELISA,用于检测杂交瘤细胞上清中的单克隆抗体.初检阳性率为13.9%.经2次亚克隆反复筛选获得了2株能稳定分泌抗猪IgG单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为6B4、4B8.ELISA证实所获得的单抗是特异性针对IgG,6B4、4B8经反复冻存,复苏及多次传代,仍能分泌高效价抗体,分泌抗体均属IgG1、κ型.本研究所获得的单克隆抗体将对检测猪抗体水平及IgG提纯发挥重要作用.
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关 键 词: | 层析技术 猪IgG 单克隆抗体 |
文章编号: | 1673-9868(2007)12-0077-04 |
收稿时间: | 2007-04-13 |
修稿时间: | 2007-04-13 |
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