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马传染性贫血病毒囊膜基因gp90 V4区糖基化回复突变感染性克隆的构建
引用本文:韩秀娥,张萍,王雪峰,孔宪刚,周建华,相文华.马传染性贫血病毒囊膜基因gp90 V4区糖基化回复突变感染性克隆的构建[J].中国预防兽医学报,2009,31(3).
作者姓名:韩秀娥  张萍  王雪峰  孔宪刚  周建华  相文华
作者单位:1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室,黑龙江,哈尔滨,150001;东北农业大学,黑龙江省乳品工业技术开发中心,黑龙江,哈尔滨,150001
2. 东北农业大学,动物医学学院,黑龙江,哈尔滨,150001
3. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室,黑龙江,哈尔滨,150001
基金项目:国家重点基础研究发展规划(973计划),黑龙江省发展高新技术产业专项资金项目 
摘    要:为了阐明我国马传染性贫血病毒(EIAV)弱毒疫苗致弱及免疫保护的分子机制,本研究分析了疫苗株及其亲本强毒株共34个囊膜基因序列.结果发现疫苗株在膜基因gp90 V4区潜在的N-连接糖基化位点出现了稳定的碱基替换,使该位点消失.为研究囊膜糖基化的作用,以疫苗株全长感染性克隆pLGFD3-8为亲本,利用反向遗传技术对该突变位点进行了糖基化序列回复突变操作,构建了全基因感染性克隆pLGFDg9.将其转染驴胎皮肤细胞(FDD).通过用逆转录酶活性、间接免疫荧光和RT-PCR方法检测而确定其感染性.结果表明,在FDD细胞中盲传3代后,在细胞培养物中可检测到逆转录酶活性,RT-PCR和间接免疫荧光检测均呈阳性,电镜下见到典型的EIAV颗粒.

关 键 词:马传染性贫血病毒  N-连接糖基化  定点突变  感染性克隆

Construction of an infectious clone within the V4 region of gp90 surface protein of EIAV by N-glycosylation revers-mutations
HAN Xiu-e,ZHANG Ping,WANG Xue-feng,KONG Xian-gang,ZHOU Jian-hua,XIANG Wen-hua.Construction of an infectious clone within the V4 region of gp90 surface protein of EIAV by N-glycosylation revers-mutations[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2009,31(3).
Authors:HAN Xiu-e  ZHANG Ping  WANG Xue-feng  KONG Xian-gang  ZHOU Jian-hua  XIANG Wen-hua
Abstract:
Keywords:
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