| BmNPV几丁质酶基因的表达及其产物对Bt杀虫剂的增效作用 |
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| 引用本文： | 顾奇伟,林建国,王芳,张传溪.BmNPV几丁质酶基因的表达及其产物对Bt杀虫剂的增效作用[J].农业生物技术学报,2005,13(1):96-101. |
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| 作者姓名： | 顾奇伟 林建国 王芳 张传溪 |
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| 作者单位： | 浙江大学应用昆虫研究所分子生物学实验室,杭州,310029 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(No.30070032)和高等学校全国优秀博士学位论文作者专项资金(No.200055)资助. |
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| 摘 要： | 用PCR方法分别扩增出BmNPV几丁质酶基因编码区全片段和去信号肽片段。将全片段克隆入原核表达载体pET28a，在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)进行融合表达。将去信号肽片段克隆入pFastBacb转移载体，重组到杆状病毒Bac-to-Bac表达系统，在粉纹夜蛾(Trichoplusia ni)细胞系(Tn-5B1-4)中进行融合表达。SDS-PAGE分析和薄层扫描显示，2片段均得到高效表达，表达产物分别占细胞总蛋白的22％和12％。将以上2种表达产物加入Bt菌液中喂食2龄家蚕(Bombyx mori)，观察并记录不同处理下家蚕的死亡时间及体重。结果表明，2种表达产物对Bt杀虫剂均有明显的增效作用。取食添加以上2种表达产物的家蚕与对照处理相比，LT50分别提前24．5和24．6h，体重增量约是对照组的1／4。
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| 关 键 词： | 表达产物 融合表达 对照组 处理 薄层扫描 ET 体重 Bt杀虫剂 家蚕 增效作用 |
Expression of BmNPV Chitinase Gene in Escherichia coli and Insect Cells and Synergistic Effect of the Expressed Products with Bt on Killing Silkworm |
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| GU Qi-Wei,LIN Jian-Guo,WANG Fang,ZHANG Chuan-Xi.Expression of BmNPV Chitinase Gene in Escherichia coli and Insect Cells and Synergistic Effect of the Expressed Products with Bt on Killing Silkworm[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2005,13(1):96-101. |
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| Authors: | GU Qi-Wei LIN Jian-Guo WANG Fang ZHANG Chuan-Xi |
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