柱花草SgPAL3基因启动子的克隆及上游转录因子的筛选

柱花草(Stylosanthes spp.)是热带地区广泛种植的重要草种，炭疽病是危害柱花草的严重病害，柱花草SgPAL3基因具有抗炭疽菌的功能。本研究对启动子区域-2 000～0 bp,-1 500～0 bp序列分别构建诱饵载体并检测自激活，结果表明500 ng·mL^-1金担子素(Aureobasidin A,AbA)可以抑制两种诱饵载体的自激活。利用Gateway技术构建了柱花草响应炭疽菌的酵母cDNA文库，其容量为1.20×10⁷,插入片段主要分布在750～2 000 bp,重组率为100%;利用酵母单杂交技术，筛选与SgPAL3基因启动子互作的转录因子，并验证了3个转录因子(SgASIL2,SgHAT5和SgZHD8)与SgPAL3启动子的互作关系；qRT-PCR分析表明，SgASIL2,SgHAT5和SgZHD8均响应炭疽菌的侵染，说明它们可能调控柱花草对炭疽病的抗性。本研究为进一步解析SgPAL3响应炭疽菌侵染的转录调控机制奠定了基础。