鸡源SAMHD1蛋白多克隆抗体的制备与鉴定

为制备鸡源宿主限制因子SAMHD1(chSAMHD1)的多克隆抗体，本试验根据chSAMHD1基因序列设计引物，扩增部分chSAMHD1片段，构建p ET-chSAMHD1原核表达质粒，并将其转化至BL21(DE3)大肠杆菌，经IPTG诱导和镍柱亲和层析纯化获得重组chSAMHD1蛋白。将重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备抗chSAMHD1多克隆抗体，通过Westernblot和IFA测定多克隆抗体的反应性。结果显示，chSAMHD1重组蛋白的相对分子质量约为75.0 k Da，与预期大小一致；重组蛋白以包涵体形式表达；所制备的chSAMHD1多克隆抗体效价达到1:512 000;IFA结果证实，本试验所制备多克隆抗体能够特异性识别DF-1细胞中过表达的chSAMHD1蛋白。以上结果表明，该研究成功制备了chSAMHD1蛋白多克隆抗体，从而为鸡源SAMHD1蛋白功能的深入研究奠定了基础。