山丹百合cpDNA-PCR反应体系建立与优化

本试验以采自青海东南部地区的山丹百合为材料,结合单因素与L_(16)(4~5)正交设计对山丹百合cpDNA-PCR反应体系的Mg~(2+)、d NTPs、引物、Taq酶和模板DNA浓度进行优化,建立最优的山丹百合cpDNA-PCR反应体系,为研究山丹百合遗传多样性及其演变提供技术支持。研究表明:在25μL反应体系中,以Mg~(2+)2.0 mmol/L、d NTPs 0.2 mmol/L、引物0.2μmol/L、Taq酶0.25 U、模板DNA 50 ng最佳,退火温度优化后为53.1℃。建立的反应体系在6个山丹百合居群中经验证具有较高的稳定性和重复性,可用于山丹百合遗传多样性和分子谱系地理学方面的研究。