我省板栗主载品种（无性系）RAPD反应体系的建立

在RAPD反应中，有许多影响结果的稳定性和准确性。本项研究采用浙江省8个板栗主载品种（无性系，）对RAPD各种反应进行了探索，结果表明，板栗理想的反应体系为：20μl反应体积含有100mmol/L Tris-HCl,500mmol/LKCl,20mmol/LMgCL2,0.01%Gelatin,dATP、dTTP、dGTP的量各为100μmol/L，50－200ng引物，0．75－1．0单位Taq酶，2－10ng模板NDA。反应条件为：94℃预变性2min，再94℃30s、40℃30s、72℃1．5min扩增37个循环；最后在72℃延伸7min。应用上述反应体系进行板栗PAPD反应，扩增产物在1．0％琼脂糖凝胶中电泳，经EB染色后在紫外灯下观察照相，可获得满意的DNA指纹图谱。