适用于转录组测序的大麦胚芽鞘保卫细胞分离方法优化 |
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引用本文: | 张子轩,郭融融,次而甲玛,王宏鹏,王俊斌,曹高燚,包曙光,谢晓东,陈小强.适用于转录组测序的大麦胚芽鞘保卫细胞分离方法优化[J].麦类作物学报,2021(4):410-416. |
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作者姓名: | 张子轩 郭融融 次而甲玛 王宏鹏 王俊斌 曹高燚 包曙光 谢晓东 陈小强 |
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作者单位: | (天津农学院农学与资源环境学院,天津300384) |
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基金项目: | 天津市大学生创新创业训练计划项目(201910061055);国家级大学生创新创业训练计划项目(202010061003);国家自然科学基金项目(31671611);国家自然科学基金青年基金项目(31801446);天津市研究生科研创新项目(2020YJSS131) |
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摘 要: | 为获取高质量的大麦幼苗胚芽鞘保卫细胞以进行转录组相关研究,以大麦品种Morex的幼苗胚芽鞘为实验材料,分别对胚芽鞘表皮条撕取方法和保卫细胞分离方法进行优化。结果表明,通过"刮压"技术,不仅可以获得完整的大麦胚芽鞘表皮条,而且缩短了获取的时间;利用纤维素酶R-10与离析酶R-10制备酶解液,同时在酶解液中加入转录抑制剂,并结合表皮条"穿孔"进行辅助酶解,发现酶解温度为30℃、酶解时间为水浴1.5 h时,可以获取大量具有活性的大麦胚芽鞘保卫细胞。
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关 键 词: | 大麦 胚芽鞘 保卫细胞 酶解 |
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