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共刺激分子配体B7-H1基因真核表达载体和转基因细胞的构建
引用本文:冯洁,王光凤,孙强,邢华,李厚达.共刺激分子配体B7-H1基因真核表达载体和转基因细胞的构建[J].扬州大学学报(农业与生命科学版),2005,26(3):17-20.
作者姓名:冯洁  王光凤  孙强  邢华  李厚达
作者单位:[1]上海实验动物研究中心,上海200032 [2]扬州大学兽医学院,江苏扬州225009 [3]上海市医药工业研究院,上海200437
基金项目:国家“十五”科技攻关项目(2001BAT0113).
摘    要:以PHA刺激的小鼠外周血单核细胞中抽提的总RNA为模板,通过RT-PCR技术,扩增出B7-H1基因。按常规方法克隆进pEF6V5His A载体,重组质粒经鉴定后采用脂质体法转染CHO细胞,48h后进行间接免疫荧光试验,72h后用Blasticidin进行筛选,挑选出能稳定表达B7-H1的细胞株。结果表明:成功地克隆小鼠B7-H1基因并构建了用于表达B7-H1基因的真核表达载体,经间接免疫荧光试验证明,该基因在CHO细胞中得到表达。经Western-blot检测表明筛选出的转基因细胞稳定表达了B7-H1基因。

关 键 词:肿瘤细胞  共刺激分子  B7-H1基因  真核表达
文章编号:1671-4652(2005)03-0017-04
收稿时间:2005-03-16
修稿时间:2005年3月16日

The constructs of eukaryotic expression vector and transgenic cell of B7-H1
FENG Jie, WANG Guang-feng, SUN Qiang, XING Hua, LI Hou-da.The constructs of eukaryotic expression vector and transgenic cell of B7-H1[J].Journal of Yangzhou University:Agricultural and Life Science Edition,2005,26(3):17-20.
Authors:FENG Jie  WANG Guang-feng  SUN Qiang  XING Hua  LI Hou-da
Institution:1. Shanghai Lab Anita Res Cen, Shanghai, 200032, China; 2. Vet Med Coll, Yangzhou Univ, Yangzhou, 225009, China; 3. Shanghai Inst of Phar Indus, Shanghai, 200437, China
Abstract:
Keywords:tumor cell  costimulate molecules  BT-H1 gene  eukaryotic expression
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