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| 含O型FMDVP1-2A、3CC基因和EGFP基因表达盒的构建 | |
| 作者姓名： | 王建科 吴国华 叶奕优 颜新敏 朱海霞 李健 朱彩珠 张强 王雯慧 |
| 作者单位： | 1. 甘肃农业大学动物医学院,甘肃,兰州,730070;中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜病原生物学国家重点实验室,农业部畜禽病毒学重点开放实验室,甘肃,兰州,730046 2. 中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜病原生物学国家重点实验室,农业部畜禽病毒学重点开放实验室,甘肃,兰州,730046 3. 深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心,广东,深圳,518001 4. 甘肃农业大学动物医学院,甘肃,兰州,730070 |
| 基金项目： | 国家重点基础研究发展规划(973计划)，国家科技基础条件平台项目 |
| 摘 要： | 采用RT-PCR方法分别扩增口蹄疫病毒O/China99毒株的P1-2A和3C基因,将P1-2A基因连接到pUC119载体,3C基因连接到pMDI8-T载体,分别得到重组载体pUCll9-P1-2A和pMDI8-T-3C;将重组载体pUCll9-P1-2A用HindⅢ、BamH I酶切,重组载体pMDI8-T-3C用BamH I、Nhe I酶切;利用酶切所得到的基因片段P1-2A、3C有共同的BamH I酶切位点,实现基因P1-2A、3C的连接,构建重组载体pMDI8-T-P1-2A-3C.,将基因P1-2A-3C与启动EGFP表达的双向串连痘苗病毒启动子P7.5相连,构建载体p-EGFP-N1-P7.5-P1-2A3C,并进行PCR扩增、酶切鉴定及序列测定.结果表明:试验成功构建了一侧启动表达P1-2A-3C基因,一侧启动表达标记基因EGFP的表达盒p-EGFP-N1-P7.5-P1-2A-3C. |
| 关 键 词： | 启动子P7.5j P1-2A基因 3C基因 |
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