| 杨树炭疽病菌原生质体遗传转化的建立及绿色荧光蛋白的表达 |
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| 引用本文： | 李思蒙,王永林,黄冬辉,田呈明.杨树炭疽病菌原生质体遗传转化的建立及绿色荧光蛋白的表达[J].林业科学,2013,49(5):121-127. |
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| 作者姓名： | 李思蒙 王永林 黄冬辉 田呈明 |
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| 作者单位： | 1. 北京林业大学林学院 省部共建森林培育与保护教育部重点实验室 北京100083
2. 河北秦皇岛经济技术开发区园林绿化管理处 秦皇岛066004 |
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| 基金项目： | 中央高校基本科研业务费，国家自然科学基金 |
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| 摘 要： | 以杨树炭疽病菌菌株C1-5-2作为受体,通过PEG介导的原生质体转化法,将含有潮霉素B(hph)和GFP表达基因的质粒gGFP转入杨树炭疽病菌菌丝的原生质体中。幼嫩菌丝在0.7mol·L-1NaCl溶解的1% Lysing enzyme酶解液的作用下酶解210min可以得到108·mL-1的原生质体;在PEG介导下,通过含有潮霉素浓度为300μg·mL-1的PDA选择培养基筛选转化子,每微克DNA获得41个转化子的平均转化效率。对转化子进行PCR鉴定表明:hph基因和GFP基因已经整合到杨树炭疽病菌转化子基因组中,通过荧光显微镜观察到转化子可以发出清晰的绿色荧光,且转化子的潮霉素抗性和GFP表达性状可以稳定遗传。
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| 关 键 词： | 杨树 炭疽菌 遗传转化 原生质体 绿色荧光蛋白 |
Establishment of a PEG-Mediated Genetic Transformation System and Expression of Green Fluorescence Protein in Colletotrichum gloeosporioides |
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| Li Simeng
,
Wang Yonglin
,
Huang Donghui
,
Tian Chengming.Establishment of a PEG-Mediated Genetic Transformation System and Expression of Green Fluorescence Protein in Colletotrichum gloeosporioides[J].Scientia Silvae Sinicae,2013,49(5):121-127. |
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| Authors: | Li Simeng Wang Yonglin Huang Donghui Tian Chengming |
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| Institution: | 1 (1.Key Laboratory for Silviculture and Conservation of Ministry of Education College of Forestry, Beijing Forestry University Beijing 100083; 2.Landscaping Management Office of Qinhuangdao Economic and Technological Development Zone Qinhuangdao 066004) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | poplar Colletotrichum genetic transformation protoplast GFP |
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