| 绵羊肺炎支原体基因组DNA表达文库的构建与鉴定 |
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| 引用本文： | 陈 诚,乔 军,孟庆玲,刘田莉,胡政香,马 玉,才学鹏,陈创夫.绵羊肺炎支原体基因组DNA表达文库的构建与鉴定[J].西北农业学报,2016,25(5):646-651. |
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| 作者姓名： | 陈 诚 乔 军 孟庆玲 刘田莉 胡政香 马 玉 才学鹏 陈创夫 |
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| 作者单位： | （1.石河子大学 动物科技学院，新疆石河子 832003；2.中国农业科学院 兰州兽医研究所，兰州 730046） |
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| 基金项目： | 国家国际科技合作专项（2014DFR31310）；兵团国际科技合作计划（2012BC006）。 |
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| 摘 要： | 为了筛选绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,MO)免疫原性相关基因,提取MO基因组DNA,利用限制性内切酶Sau3AⅠ对基因组DNA进行酶切,回收500~3 000bp的基因组DNA片段,用T4DNA连接酶将其与经BamHⅠ酶切并去磷酸化处理的pET28a/b/c载体连接,然后转化至DH5α感受态细胞,通过菌液PCR对插入到载体中的片段大小及插入率进行鉴定。从转化的平板上提取质粒,转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,构建MO基因组表达文库。随机挑选单菌落,用pET28a/b/c通用引物进行PCR鉴定,结果显示插入片段大小为300~2 000bp,插入率为90%,表明成功构建了MO基因组表达文库,该文库的构建为进一步筛选MO相关的免疫性基因及潜在候选疫苗靶点奠定前期基础。
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| 关 键 词： | MO 基因组表达文库 构建 鉴定 |
Construction and Identification of Genomic DNA Expressions Library of Mycoplasma ovipneumoniae |
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| CHEN Cheng,QIAO Jun,MENG Qingling,LIU Tianli,HU Zhengxiang,MA Yu,CAI Xuepeng and CHEN Chuangfu.Construction and Identification of Genomic DNA Expressions Library of Mycoplasma ovipneumoniae[J].Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica,2016,25(5):646-651. |
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| Authors: | CHEN Cheng QIAO Jun MENG Qingling LIU Tianli HU Zhengxiang MA Yu CAI Xuepeng and CHEN Chuangfu |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | MO Genomic expression library Construction Identification |
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