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北京油鸡cDNA文库的构建及purH基因的表达
引用本文:郭俣,刘长青,陆涛峰,佟春玲,修晓娜,关伟军,马月辉.北京油鸡cDNA文库的构建及purH基因的表达[J].南京农业大学学报,2010,33(4).
作者姓名:郭俣  刘长青  陆涛峰  佟春玲  修晓娜  关伟军  马月辉
作者单位:1. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京100094;蚌埠医学院检验系,安徽,蚌埠,233030
2. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京100094;蚌埠医学院生物科学系,安徽,蚌埠,233030
3. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京,100094
4. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京100094;内蒙古农业大学动物科学与医学院,内蒙古,呼和浩特,010018
基金项目:国家863计划项目,国家自然科学基金项目,安徽省省级自然科学研究项目 
摘    要:利用SMART技术构建了北京油鸡肝脏全长cDNA文库,构建的未扩增文库滴度为1.96×106pfu·mL-1,文库重组率为92.8%,插入片段长度为1.23 kb,扩增文库滴度为1.64×1010pfu·mL-1.设计purH基因保守引物对该文库进行筛选,克隆了北京油鸡purH基因(GenBank登录号:EU334506),将purH基因完整开放阅读框定向插入pEGFP-N3,构建带有GFP报告基因重组表达载体pEGFP-N3-purH,将其导入北京油鸡体外培养细胞中.转染后24、48和72 h,pEGFP-N3-purH转染率为10.3%~53.2%,绿色荧光均匀分布于细胞质与细胞核中.随表达量的增加,绿色荧光在细胞核中聚集成团块状或颗粒状.结果表明,构建的北京油鸡肝脏组织cDNA文库符合建库要求.

关 键 词:北京油鸡  SMART  cDNA文库  purH基因

Construction and characterization of a cDNA library from Beijing fatty chicken and expression analysis of purH gene
GUO Yu,LIU Chang-qing,LU Tao-feng,TONG Chun-ling,XIU Xiao-na,GUAN Wei-jun,MA Yue-hui.Construction and characterization of a cDNA library from Beijing fatty chicken and expression analysis of purH gene[J].Journal of Nanjing Agricultural University,2010,33(4).
Authors:GUO Yu  LIU Chang-qing  LU Tao-feng  TONG Chun-ling  XIU Xiao-na  GUAN Wei-jun  MA Yue-hui
Abstract:
Keywords:
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