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| 北京油鸡cDNA文库的构建及purH基因的表达 | |
| 引用本文： | 郭俣,刘长青,陆涛峰,佟春玲,修晓娜,关伟军,马月辉.北京油鸡cDNA文库的构建及purH基因的表达[J].南京农业大学学报,2010,33(4). |
| 作者姓名： | 郭俣 刘长青 陆涛峰 佟春玲 修晓娜 关伟军 马月辉 |
| 作者单位： | 1. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京100094;蚌埠医学院检验系,安徽,蚌埠,233030 2. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京100094;蚌埠医学院生物科学系,安徽,蚌埠,233030 3. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京,100094 4. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京100094;内蒙古农业大学动物科学与医学院,内蒙古,呼和浩特,010018 |
| 基金项目： | 国家863计划项目，国家自然科学基金项目，安徽省省级自然科学研究项目 |
| 摘 要： | 利用SMART技术构建了北京油鸡肝脏全长cDNA文库,构建的未扩增文库滴度为1.96×106pfu·mL-1,文库重组率为92.8%,插入片段长度为1.23 kb,扩增文库滴度为1.64×1010pfu·mL-1.设计purH基因保守引物对该文库进行筛选,克隆了北京油鸡purH基因(GenBank登录号:EU334506),将purH基因完整开放阅读框定向插入pEGFP-N3,构建带有GFP报告基因重组表达载体pEGFP-N3-purH,将其导入北京油鸡体外培养细胞中.转染后24、48和72 h,pEGFP-N3-purH转染率为10.3%～53.2%,绿色荧光均匀分布于细胞质与细胞核中.随表达量的增加,绿色荧光在细胞核中聚集成团块状或颗粒状.结果表明,构建的北京油鸡肝脏组织cDNA文库符合建库要求. |
| 关 键 词： | 北京油鸡 SMART cDNA文库 purH基因 |
Construction and characterization of a cDNA library from Beijing fatty chicken and expression analysis of purH gene |
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| GUO Yu,LIU Chang-qing,LU Tao-feng,TONG Chun-ling,XIU Xiao-na,GUAN Wei-jun,MA Yue-hui.Construction and characterization of a cDNA library from Beijing fatty chicken and expression analysis of purH gene[J].Journal of Nanjing Agricultural University,2010,33(4). | |
| Authors: | GUO Yu LIU Chang-qing LU Tao-feng TONG Chun-ling XIU Xiao-na GUAN Wei-jun MA Yue-hui |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
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