| 利用不同基因转移方法构建转基因红鲤 |
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| 引用本文： | 汤泽源,薛良义,胡铭炎. 利用不同基因转移方法构建转基因红鲤[J]. 农业生物技术学报, 2013, 21(1): 19-28 |
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| 作者姓名： | 汤泽源 薛良义 胡铭炎 |
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| 作者单位： | 宁波大学海洋学院,宁波,315211 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目，浙江省科技厅项目，宁波市科技局项目 |
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| 摘 要： | 本实验研究了大黄鱼肌肉生长抑素前肽基因对红鲤的促生长作用。分别通过RT-PCR和PCR从大黄鱼(Larimichtys crocea)和pIRES-EGFP质粒扩增得到了肌肉生长抑素(MSTN)前肽基因及核糖体内部进入位点序列(IRES)-增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)片段,经测序验证正确后,构建了Tol2转座子供体质粒pT2AL200R150G-MSTN propeptide-IRES-EGFP。通过精子介导法(S1、S2组)、电穿孔法(E1、E2组)及基因枪法构建转基因红鲤(Cyprinus carpio),孵化72h后的鱼苗经荧光显微镜检测,EGFP表达阳性率为:精子介导法S1组38%,精子介导法S2组48%,电穿孔E1组47%,电穿孔E2组53%,基因枪组2%;孵化10d的仔鱼RT-PCR检测EGFP和MSTN前肽基因阳性率为:精子介导法S1组35%,精子介导法S2组45%,电穿孔E1组45%,电穿孔E2组55%,基因枪组1.8%。孵化后75d转基因红鲤与对照组相比,体长和体重分别提高了21.31%和27.59%。本实验结果表明,精子经高渗、低渗保存剂处理并通过电穿孔作用可大幅提高基因转移效率。
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| 关 键 词： | Tol2 大黄鱼肌肉生长抑素前肽 转基因 生长 |
Construction of Transgenic Red Carp (Cyprinus carpio) by Different Gene Transfer Methods |
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| TANG Ze-Yuan , XUE Liang-Yi , HU Ming-Yan. Construction of Transgenic Red Carp (Cyprinus carpio) by Different Gene Transfer Methods[J]. Journal of Agricultural Biotechnology, 2013, 21(1): 19-28 |
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| Authors: | TANG Ze-Yuan XUE Liang-Yi HU Ming-Yan |
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| Affiliation: | TANG Ze-Yuan XUE Liang-Yi HU Ming-Yan School of Marine Science,Ningbo University,Ningbo 315211,China |
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