冠突曲霉Ac-nsdD基因鉴定分析及抗盐胁迫功能分析 |
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作者姓名: | 余春芳 曹广鑫 张亭笛 吴炅臻 杨靖 谭玉梅 刘永翔 刘作易 位秀丽 |
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作者单位: | 1. 湖北医药学院基础医学院微生物学教研室;2. 湖北医药学院药护学院;3. 湖北医药学院第一临床学院;4. 湖北医药学院第三临床学院;5. 贵州省农业生物技术重点实验室;6. 贵州省生物技术研究所 |
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摘 要: | 【目的】进一步探讨GATA转录因子Ac-nsdD在茯砖茶的冠突曲霉中的调控作用。【方法】根据基因组注释结果及构建系统进化对冠突曲霉Ac-NsdD蛋白序列分析。运用同源重组和根癌农杆菌介导的方法构建Ac-nsdD基因敲除的突变体,对突变体进行表型分析。【结果】根据基因组注释结果分析冠突曲霉Ac-nsdD编码一个假定的具有保守DNA结合结构域ZnF GATA的转录因子。系统进化分析表明,Ac-nsdD与其它真菌同源的NsdD有较为紧密的亲缘关系。进一步运用同源重组的方法,获得一个该基因敲除的突变体。与野生型菌株比较,突变体在M3Y培养基培养,表现为产闭囊壳量明显减少;然而在5%NaCl M3Y培养基培养,突变体表现产闭囊壳量变少,产分生孢子量显著变多,中间培养物黑色色素形成显著增加,生长速度变小;在17%NaCl M3Y培养基培养,突变体表现闭囊壳数目几乎为零,分生孢子量变少,生长速度变小。【结论】Ac-nsdD基因在无盐环境下可能激活有性发育。该基因在应答低渗透压盐胁迫条件下,可能激活有性发育和抑制无性发育,平衡有性和无性发育,且参与色素的生物合成;在应答高渗透压盐胁迫条件下,可能激活有...
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关 键 词: | 冠突曲霉 Ac-NsdD 同源重组 基因敲除 盐胁迫 |
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