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猪链球菌2型mrp基因ORF1序列的克隆及原核表达
引用本文:孙瑜隆,柳纪省,魏虎来,李学瑞.猪链球菌2型mrp基因ORF1序列的克隆及原核表达[J].中国兽医科技,2007,37(8):675-678.
作者姓名:孙瑜隆  柳纪省  魏虎来  李学瑞
作者单位:[1]兰州大学医学试验中心,甘肃兰州730000 [2]中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室,甘肃兰州730046
基金项目:国家重点基础研究发展规划(973)前期专项(2004CCA00500).
摘    要:根据猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白基因(mrp)的序列,设计并合成了1对特异性引物,以青海株的基因组DNA为模板扩增了mrp基因ORF1序列。将PCR产物进行了T/A克隆,转化大肠杆菌,鉴定成功获得目的片段后,将其定向亚克隆到pET-28a(+)中,构建了原核表达质粒pET-28a-mrp,并将其转化至大肠杆菌BL21感受态细胞中,经1 mmol/L IPTG诱导和SDS-PAGE分析,出现了与预期目的蛋白一致的外源蛋白带(27.0 ku)。Western-blot分析表明,该融合蛋白具有MRP的抗原表位。研究结果为今后开展该病的免疫学研究奠定了一定基础。

关 键 词:猪链球菌2型  溶菌酶释放蛋白  融合表达
文章编号:1673-4696(2007)08-0675-04
收稿时间:2007-02-05
修稿时间:2007-07-23

Cloning and prokaryotic expression of ORF1 sequence of mrp gene of Streptococcus suis type 2
SUN Yu-long ,LIU Ji-xing ,WEI Hu-lai ,LI Xue-rui.Cloning and prokaryotic expression of ORF1 sequence of mrp gene of Streptococcus suis type 2[J].Chinese Journal of Veterinary Science and Technology,2007,37(8):675-678.
Authors:SUN Yu-long  LIU Ji-xing  WEI Hu-lai  LI Xue-rui
Abstract:
Keywords:Streptococcus suis type 2  muramidase-released protein  fusion expression
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