| 新疆红肉苹果PGIP基因的克隆及原核表达 |
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| 引用本文： | 孙华,王春燕,宋杨,吴树敬,张芮,冯守千,陈晓流,陈学森. 新疆红肉苹果PGIP基因的克隆及原核表达[J]. 果树学报, 2013, 0(1): 1-7 |
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| 作者姓名： | 孙华 王春燕 宋杨 吴树敬 张芮 冯守千 陈晓流 陈学森 |
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| 作者单位： | 山东农业大学作物生物学国家重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划课题(2011CB100606);国家自然科学基金项目(31171932) |
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| 摘 要： | 【目的】研究克隆新疆红肉苹果[Malus sieversii f.neidzwetzkyana(Dieck)Langenf]PGIP基因并进行原核表达,探讨其抗病机制。【方法】根据Genbank中已经发表的‘金冠’苹果PGIP保守区域设计1对特异引物,以新疆红肉苹果叶片总RNA为模板,T/A克隆后进行序列测定,并对该序列进行分析。随后将该蛋白成熟肽cDNA片段连接到原核表达载体pET30a(+)中,构建融合表达质粒,转化到E.coli BL21(DE3)中进行表达。【结果】序列分析表明,新疆红肉苹果PGIP基因cDNA编码区全长993 bp,编码330个氨基酸残基,命名为MsPgip,GenBank登录号为JQ001783。MsPgip分子质量为36.6 kD,等电点为7.05,有6个潜在的N-糖基化位点,信号肽为N端24个氨基酸残基。该蛋白质还具有2个连续的24个氨基酸残基大小的LRR基序(LSQLKNLTFLDLSFNNLTGAIPSSLSQ LPNLNALHLDRN-KLTGHIPIS)。与已克隆的‘澳洲青苹’、‘金冠’、‘富士’苹果PGIP氨基酸序列同源性均高达99%。原核表达产物经SDS-PAGE分析表明,表达蛋白的分子质量与预期一致。【结论】克隆了新疆红肉苹果PGIP基因,并可在大肠杆菌中表达。
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| 关 键 词： | 新疆红肉苹果 多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白 基因克隆 表达 |
Cloning and expression in E.coli of polygalacturonase-inhibiting protein gene in Malus sieversii f.neidzwetzkyana |
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| SUN Hua,WANG Chun-yan,SONG Yang,WU Shu-jing,ZHANG Rui,FENG Shou-qian,CHEN Xiao-liu,CHEN Xue-sen. Cloning and expression in E.coli of polygalacturonase-inhibiting protein gene in Malus sieversii f.neidzwetzkyana[J]. Journal of Fruit Science, 2013, 0(1): 1-7 |
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| Authors: | SUN Hua WANG Chun-yan SONG Yang WU Shu-jing ZHANG Rui FENG Shou-qian CHEN Xiao-liu CHEN Xue-sen |
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| Affiliation: | (State Key Laboratory of Crop Biology,Shandong Agricultural University,Tai’an,Shandong 271018 China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Malus sieversii f.neidzwetzkyana Polygalacturonase-inhibiting protein(PGIP) Gene cloning Expression |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
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