| 牛γ-干扰素在大肠杆菌与毕赤酵母中的表达及抗病毒活性比较** |
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| 引用本文： | 史喜菊,张灿,韩春来,夏春,汪明. 牛γ-干扰素在大肠杆菌与毕赤酵母中的表达及抗病毒活性比较**[J]. 农业生物技术学报, 2005, 13(4): 461-467 |
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| 作者姓名： | 史喜菊 张灿 韩春来 夏春 汪明 |
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| 作者单位： | 中国农业大学动物医学院,北京,100094 |
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| 基金项目： | 国家“十五”攻关项目（No.2002BA514A-16-4）资助. |
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| 摘 要： | 用RT-PCR从经ConA刺激的荷斯坦奶牛外周血淋巴细胞总RNA中扩增了BolFN-γ基因，克隆人pGEM T-easy载体测序。再亚克隆其成熟肽基因，分别构建大肠杆菌（Escherichia coli）表达载体pET28a／BolFN-γ和毕赤酵母（Pichia pastoris）表达载体pPICZα／BolFN-γ前者存Ecoli BL21中经IPTG诱导实现了高效表达，表达蛋白占菌体总蛋白的30％，表达产物以包涵体形式存；后者存P. pastorisGS115中经甲醇诱导实现了高效分泌表达，表达产物直接分泌到培养上清中，表达量约为1．0g／L。分别在CEF／VSV和MDBK／VSV细胞系上对2种表达蛋白的抗病毒活性进行了比较，结果表明，两种重组蛋白在MDBK／VSV抗病毒活性高于在CEF／VSV上的活性，而毕赤酵母表达的蛋白抗病毒活性高于大肠杆表达蛋白，约为前者的2倍。
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| 关 键 词： | 牛γ-干扰素 分于克隆 大肠杆菌 毕赤酵母 抗病毒活性 荷斯坦奶牛 活性比 γ-干扰素 高效分泌表达 外周血淋巴细胞 |
| 收稿时间： | 2004-08-04 |
| 修稿时间： | 2004-11-02 |
Expressions of Bovine Interferon-γin Escherichia coli and Pichia pastoris and Comparision of Their Antiviral Activities |
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| SHI Xi-Ju,ZHANG Can,HAN Chun-Lai,XIA Chun,WANG Ming. Expressions of Bovine Interferon-γin Escherichia coli and Pichia pastoris and Comparision of Their Antiviral Activities[J]. Journal of Agricultural Biotechnology, 2005, 13(4): 461-467 |
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| Authors: | SHI Xi-Ju ZHANG Can HAN Chun-Lai XIA Chun WANG Ming |
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