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| 草鱼肝细胞脂变模型的建立及脂代谢基因表达分析 | |
| 引用本文： | 卢荣华,梁旭方,孙君君,杨峰,王敏,李玺洋,白小丽. 草鱼肝细胞脂变模型的建立及脂代谢基因表达分析[J]. 中国水产科学, 2015, 22(1): 21-32 |
| 作者姓名： | 卢荣华 梁旭方 孙君君 杨峰 王敏 李玺洋 白小丽 |
| 作者单位： | 1. 华中农业大学 水产学院，湖北 武汉 430070; 河南师范大学 水产学院，河南 新乡 453007 2. 华中农业大学 水产学院,湖北 武汉,430070 3. 河南师范大学 水产学院,河南 新乡,453007 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金项目，河南省基础与前沿技术研究计划项目 |
| 摘 要： | 为了筛选草鱼肝细胞脂肪变性的最佳诱导剂及浓度,并初步分析脂肪乳剂(lipid emulsions,LE)引起草鱼肝细胞脂肪变性的作用机理,以草鱼(Ctenopharyngodon idellus)正常肝细胞为研究对象,建立草鱼脂肪变性肝细胞模型,以含10%胎牛血清的基础培养液为对照组,处理组为含20%脂肪乳剂0.5~2 m L/L和含20%、50%胎牛血清的诱导培养液,孵育草鱼肝细胞48 h后,定量分析肝细胞内的甘油三酯(TG)含量,观察脂滴积聚情况及肝细胞超微结构的变化,检测细胞培养上清中谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate transaminase,AST)的活性,q RT-PCR技术检测脂代谢关键基因(PPAR?、PPAR?、SREBP-1c、LPL、Lep和UCP2)的转录水平变化,蛋白质印迹技术检测PPAR?、SREBP-1c的蛋白水平变化。结果发现,含1~2 m L/L LE的诱导液组和含20%、50%FBS的诱导液组与对照组相比TG含量均显著上升(P0.05),且20%FBS和各浓度LE诱导组的转氨酶活性与对照组相比差异不显著(P0.05),表明含1~2 m L/L LE的诱导液和含20%FBS的诱导液均可建立草鱼营养性脂肪肝细胞模型。在肝细胞脂变模型中,PPARγ和LPL等脂代谢基因的表达量显著升高(P0.05),而Lep基因表达量显著降低(P0.05),PPARγ和SREBP-1c的蛋白水平升高。结论认为:采用1~2 m L/L LE和20%的FBS均可以在短时间内建立草鱼肝细胞脂肪变性模型,含1 m L/L LE的诱导液诱导效果最佳;肝细胞内脂质的蓄积可能与脂肪代谢关键基因PPARγ、SREBP-1c、LPL及Lep等密切相关。 |
| 关 键 词： | 草鱼 肝细胞 脂肪变性 基因表达 脂质代谢 细胞模型 |
| 修稿时间： | 2015-06-23 |
Establishment of a model of grass carp hepatocyte steatosis and analysis of lipid metabolism gene expression |
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| LU Ronghu,LIANG Xufang,SUN Junjun,YANG Feng,WANG Min,LI Xiyang,BAI Xiaoli. Establishment of a model of grass carp hepatocyte steatosis and analysis of lipid metabolism gene expression[J]. Journal of Fishery Sciences of China, 2015, 22(1): 21-32 | |
| Authors: | LU Ronghu LIANG Xufang SUN Junjun YANG Feng WANG Min LI Xiyang BAI Xiaoli |
| Affiliation: | College of Fisheries, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, China;College of Fisheries, Henan Normal University, Xinxiang 453007, China |
| Abstract: | |
| Keywords: | Ctenopharyngodon idellus hepatocyte steatosis gene expression lipid metabolism cell model |
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