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块根特异启动的木薯SBE I、SBE Ⅱ基因 RNAi载体的构建及鉴定
作者姓名:弓淑芳  郭安平  郭运玲  孔华  阳辛凤  贺立卡
作者单位:1 海南大学农学院 2 中国热带农业科学院热带生物技术研究所;中国热带农业科学院热带生物技术研究所;中国热带农业科学院热带生物技术研究所;中国热带农业科学院热带生物技术研究所;中国热带农业科学院热带生物技术研究所;中国热带农业科学院热带生物技术研究所
基金项目:国家自然科学基金项目(No.30960204);国家重点基础研究发展计划(973)项目(No.2010CB126605);中央级公益性科研院所基本科研业务费(No.ITBB110601)。
摘    要:利用基因重组技术,分别克隆木薯SBEⅠ基因ORF中的494 bp的片段和SBEⅡ基因ORF中的340 bp的片段;并通过重叠延伸PCR方法,扩增融合SBEⅠ、SBEⅡ基因片段的大片段SⅢ,将其正向、反向插入植物RNAi表达载体pART27中,同时克隆块根特异性启动子取代原来载体上自有的35S启动子,构建块根特异启动的可编码发夹结构的RNAi表达载体Sp-pRNAiSⅢ,为后续培育高直链淀粉含量的木薯新品种等实验打下基础。

关 键 词:木薯  高直链淀粉  RNA干扰技术  重叠延伸PCR
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