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鸡柔嫩艾美耳球虫特异性抗体EtMIC4-N蛋白BAS-ELISA检测方法的建立
引用本文:刘新月,王黎霞,宋丽聪,赵晨璐,张建军,安 健. 鸡柔嫩艾美耳球虫特异性抗体EtMIC4-N蛋白BAS-ELISA检测方法的建立[J]. 中国农学通报, 2015, 31(14): 44-50
作者姓名:刘新月  王黎霞  宋丽聪  赵晨璐  张建军  安 健
作者单位:北京农学院动物科学技术学院,北京农业职业学院畜牧兽医系,北京农学院动物科学技术学院,北京农学院动物科学技术学院,北京农学院动物科学技术学院,北京农学院动物科学技术学院
基金项目:基金项目:国家自然基金资助项目(31072128)。
摘    要:为了检测柔嫩艾美耳球虫感染鸡血清中特异性抗体水平,原核表达纯化EtMIC4-N蛋白,采用免疫印迹法确定其反应原性,再以纯化后的蛋白为包被抗原,以生物素标记的羊抗鸡IgG为二抗,以HRP结合链霉亲和素为酶标抗体,建立了检测柔嫩艾美耳球虫抗体的BAS-ELISA方法。经检测,EtMIC4-N蛋白最佳包被浓度为7μg/mL,最适封闭液为1%BSA,最佳血清稀释度为1:80,二抗稀释度为1:100000,酶标抗体稀释度为1:100000,最适显色时间为15min,组内和组间变异系数均小于10%。通过动物感染试验验证,结果表明建立的BAS-ELISA可以用于检测柔嫩艾美耳球虫特异性抗体的检测,并且具有简便,快速,灵敏,成本低等特点。

关 键 词:鸡;柔嫩艾美耳球虫;特异性抗体;EtMIC4-N蛋白;BAS-ELISA
收稿时间:2015-01-29
修稿时间:2015-03-18

Establishment of BAS-ELISA Method with Recombinant EtMIC4-N Protein for the Detection of Antibodies Against Chicken Eimeria tenella
Liu Xinyue,Wang Lixi,Song Licong,Zhao Chenlu,Zhang Jianjun and An Jian. Establishment of BAS-ELISA Method with Recombinant EtMIC4-N Protein for the Detection of Antibodies Against Chicken Eimeria tenella[J]. Chinese Agricultural Science Bulletin, 2015, 31(14): 44-50
Authors:Liu Xinyue  Wang Lixi  Song Licong  Zhao Chenlu  Zhang Jianjun  An Jian
Affiliation:College of Animal Science and Technology, Beijing University of Agriculture,Beijing Vocational College of Agriculture,College of Animal Science and Technology, Beijing University of Agriculture,College of Animal Science and Technology, Beijing University of Agriculture,College of Animal Science and Technology, Beijing University of Agriculture,College of Animal Science and Technology, Beijing University of Agriculture
Abstract:
Keywords:chicken   Eimeria tenlla   specific antibody   EtMIC4-N protein   BAS-ELISA
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