黄颡鱼维氏气单胞菌体内诱导基因的筛选

为筛选黄颡鱼维氏气单胞菌(A.veronii)体内诱导基因,本研究将A.veronii人工感染黄颡鱼,取不同感染时间的血清并混合,分别利用体外培养的A.veronii和宿主菌BL21(DE3)全菌体、两者菌体裂解物以及其热变性裂解物与血清充分吸附处理,同时构建黄颡鱼A.veronii基因组的p ET-30a/b/c系列重组质粒表达文库。以吸附后的血清为探针,采用菌落原位杂交技术对A.veronii基因组文库进行免疫筛选,将筛选的阳性克隆进行测序、分析。结果显示:最终获得了5个A.veronii基因的开放阅读框,分别为核苷酸通透酶nup C基因、多药转运蛋白mat E基因、羧基肽酶cpg2基因、Ⅲ型分泌系统asc V基因以及保守假想蛋白基因。本研究结果为深入了解A.veronii致病的分子机制及保护性抗原的筛选奠定基础。