普通烟草茉莉酸生物合成途径3个基因的分子克隆、表征和表达分析 |
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引用本文: | 武兆云,孙聚涛,张智强,薛刚,杨铁钊.普通烟草茉莉酸生物合成途径3个基因的分子克隆、表征和表达分析[J].江苏农业科学,2022(18):75-81. |
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作者姓名: | 武兆云 孙聚涛 张智强 薛刚 杨铁钊 |
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作者单位: | 河南农业大学烟草学院 |
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基金项目: | 河南省高校重点科研项目(编号:17B210004); |
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摘 要: | 以普通烟草(Nicotiana tabacum L.)为材料,同源克隆烟草NtLOX、NtAOS和NtAOC基因,对其序列进行分析,构建过表达载体和进行低钾胁迫表达分析。蛋白质序列比对和进化树分析结果表明,NtLOX、NtAOS分别属于植物脂氧合酶(IPR001246)、细胞色素P450(IPR002403)家族,其中NtAOC具有异构酶活性(GO:0016853)。根据氨基酸序列预测结果,NtAOS、NtAOC定位于叶绿体,而NtLOX定位于细胞质。为了对基因功能进行研究,构建3个基因的过表达载体。qRT-PCR分析结果表明,在缺钾条件下,与低钾不耐受(敏感)基因型烟草品种相比,耐低钾基因型中NtLOX在转录物水平升高得更早且持续时间更长。因此,NtLOX的表达水平可能与烟草植物对低钾胁迫的抗性密切相关。研究结果为揭示NtLOX、NtAOS和NtAOC在低钾胁迫中的分子机制奠定了研究基础。
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关 键 词: | 普通烟草 脂氧合酶 丙二烯氧化物合酶 丙二烯氧化物环化酶 分子克隆 生物信息学分析 表达分析 |
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