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国兰杂交品种(系)SRAP-PCR反应体系优化及引物快速筛选
引用本文:龚 理,黄添毅,王 芳,陈倩淑,吴少华,李永裕. 国兰杂交品种(系)SRAP-PCR反应体系优化及引物快速筛选[J]. 热带作物学报, 2014, 35(5): 925-932
作者姓名:龚 理  黄添毅  王 芳  陈倩淑  吴少华  李永裕
作者单位:福建农林大学园艺学院;福建农林大学园艺学院;福建农林大学园艺学院;福建农林大学园艺学院;福建农林大学园艺学院;福建农林大学园艺学院
基金项目:国家科技支撑计划项目(No. 2007BAD07B01)。
摘    要:以国兰杂交品种(系)为材料,采用L16(45)正交试验设计对Taq DNA聚合酶、Mg2+、dNTPs、模板及引物等5个重要影响因素进行优化,确定国兰杂交品种(系)SRAP-PCR反应的最优反应体系为(25μL体系):Taq DNA聚合酶,1 U;Mg2+,1.8 mmol/L;dNTPs,0.08 mmol/L;模板DNA,100 ng;引物,上下游各0.3 mmol/L;10×PCR Buffer,2.5μL。此外,本试验采用DNA混合池技术(DNA pooling)快速筛选SRAP引物,从180对SRAP引物组合中筛选出39对扩增产物丰富、多态性高的引物组合。与常规方法相比,该技术明显缩短试验周期、节约了模板用量,为快速高效筛选SRAP引物提供了新思路。

关 键 词:SRAP-PCR;体系优化;DNA混合池;引物筛选

Optimization SRAP-PCR System and Quickly Screening Primers for Hybridization Cultivars(Lines)of Chinese Cymbidium
GONG Li,HUANG Tianyi,WANG fang,CHEN Qianshu,WU Shaohua and LI Yongyu. Optimization SRAP-PCR System and Quickly Screening Primers for Hybridization Cultivars(Lines)of Chinese Cymbidium[J]. Chinese Journal of Tropical Crops, 2014, 35(5): 925-932
Authors:GONG Li  HUANG Tianyi  WANG fang  CHEN Qianshu  WU Shaohua  LI Yongyu
Affiliation:College of Horticulture, Fujian Agriculture and Forestry University;College of Horticulture, Fujian Agriculture and Forestry University;College of Horticulture, Fujian Agriculture and Forestry University;College of Horticulture, Fujian Agriculture and Forestry University;College of Horticulture, Fujian Agriculture and Forestry University;College of Horticulture, Fujian Agriculture and Forestry University
Abstract:
Keywords:SRAP   System optimization   DNA pooling   Screening primers
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