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猪圆环病毒2型ORF2/猪白介素2(POIL-2)嵌合基因真核表达载体的构建、表达及在小鼠体内的免疫效果
引用本文:贾松涛,闫若潜,崔保安,吴志明,张志凌,张健,赵雪丽. 猪圆环病毒2型ORF2/猪白介素2(POIL-2)嵌合基因真核表达载体的构建、表达及在小鼠体内的免疫效果[J]. 农业生物技术学报, 2008, 16(5)
作者姓名:贾松涛  闫若潜  崔保安  吴志明  张志凌  张健  赵雪丽
作者单位:1. 河南农业大学牧医工程学院,郑州,450002
2. 河南省动物疫病预防控制中心,郑州,450008
摘    要:为了研究猪圆环病毒2型(Porcine circovirus typc 2,PCV2)核酸疫苗,采用重叠延伸PCR(splicing by overlap extension-PCR,SOE-PCR)方法通过--基因柔性接头(linker)(G4S)3,将PCV2的ORF2全长基因和猪白介素2成熟肽基因(PoIL-2)构建成PCV2-linker-PoIL-2嵌合基因并克隆入pcDNA3.1( )真核表达载体中;筛选阳性重组表达质粒(rpcDNA3.1/PCV2-linker-PoIL-2)转染COS-7细胞,分别采用PCV2抗原间接免疫荧光和PoIL-2蛋白ELISA方法检测COS-7细胞中表达的重组融合蛋(rCap-linker-PoIL-2)生物学活性;提取rpcDNA3.1/PCV2-linker-PoIL-2和只含PCV2 ORF2基因的重组表达质粒PcDNA3.1/OFR2(rpcDNA3.1/OFR2)免疫Balb/c小鼠并检测其免疫效果.结果表明,成功构建了PCV2-linker-PoIL-2嵌合基因及其pcDNA3.1( )重组表达质粒;rpcDNA3.1/PCV2-linker-PoIL-2在COS-7细胞浆内进行了表达,表达的rCap-linker-PoIL-2融合蛋白可分别与抗PCV2和抗PoIL-2蛋白抗血清发生特异性免疫反应,表明rCap-linker-PoIL-2蛋白具有Cap和PoIL-2蛋白的双重生物学活性;rpcDNA3.1/PCV2-linker-PoIL-2质粒免疫小鼠后可诱导产生明显的抗PCV2抗体,且其诱导的抗体水平明显高于rpcDNA3.1/OFR2.

关 键 词:猪圆环病毒2型  猪白介素2  嵌合基因  核酸疫苗  免疫效果

Construction and Expression of the Eukaryotic Expression Vector of Porcine circovirus Type 2 ( ORF2 )/Porcine Interleukin-2 (POIL-2) Chimeric Gene and Its Immune Effect on Mice
JIA Song-tao,YAN Ruo-qian,CUI Bao-an,WU Zhi-ming,ZHANG Zhi-ling,ZHANG Jian,ZHAO Xue-li. Construction and Expression of the Eukaryotic Expression Vector of Porcine circovirus Type 2 ( ORF2 )/Porcine Interleukin-2 (POIL-2) Chimeric Gene and Its Immune Effect on Mice[J]. Journal of Agricultural Biotechnology, 2008, 16(5)
Authors:JIA Song-tao  YAN Ruo-qian  CUI Bao-an  WU Zhi-ming  ZHANG Zhi-ling  ZHANG Jian  ZHAO Xue-li
Abstract:
Keywords:
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