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坏死梭杆菌白细胞毒素基因BSBSE片段的克隆及原核表达
引用本文:陈立志,冯书章,张秀华,王克坚,刘晓颖.坏死梭杆菌白细胞毒素基因BSBSE片段的克隆及原核表达[J].吉林农业大学学报,2007,29(5):568-571.
作者姓名:陈立志  冯书章  张秀华  王克坚  刘晓颖
作者单位:吉林大学畜牧兽医学院,长春,130062;中国农业科学院特产研究所,吉林,132109;解放军军事医学科学院军事兽医研究所,长春,130062;中国农业科学院特产研究所,吉林,132109;中国农业科学院特产研究所,吉林,132109;厦门大学海洋环境学院,厦门,361005
基金项目:国家科技攻关计划 , 中国农业科学院科研项目
摘    要:以牛源坏死梭杆菌FNn株为试材,根据GenBank上已发表的坏死梭杆菌AF312861标准菌株的lktA序列设计1对引物,利用PCR技术扩增出1 131 bp的坏死梭杆菌白细胞毒素BSBSE基因。将PCR产物插入pGEM-T Easy vector中,经双酶切鉴定正确后进行序列测定。分析表明该BSBSE序列与GenBank上已发表的坏死梭杆菌AF312861标准菌株的lktA序列的核苷酸同源性为99%,推导出的氨基酸序列同源性为98%。为研究BSBSE的免疫原性,构建了原核表达载体pMAL-p2X-BSBSE,用IPTG诱导在大肠杆菌中表达。结果表明,BSBSE基因在大肠杆菌中进行了高效特异性融合表达,融合蛋白分子量约为84.5×103,其中41.5×103为BS-BSE基因表达的蛋白质,43.0×103为MBP融合标签,Western-blotting检测表明该表达产物有免疫原性。

关 键 词:坏死梭杆菌  白细胞毒素  BSBSE  克隆  表达
文章编号:1000-5684(2007)05-0568-04
修稿时间:2006-11-20

Cloning and Expression of the Leukotoxin BSBSE Gene from Fusobacterium necrophorum
CHEN Li-zhi,FENG Shu-zhang,ZHANG Xiu-hua,WANG Ke-jian,LIU Xiao-ying.Cloning and Expression of the Leukotoxin BSBSE Gene from Fusobacterium necrophorum[J].Journal of Jilin Agricultural University,2007,29(5):568-571.
Authors:CHEN Li-zhi  FENG Shu-zhang  ZHANG Xiu-hua  WANG Ke-jian  LIU Xiao-ying
Institution:1. College of Animal Science and Veterinary Medicine, Jilin University, Changchun 130062, China; 2. Institute of Economical Wild Animal and Plant Research, CAAS, Jilin 132109, China ; 3. The Military Veterinary Institute, Academy of Military Medical Sciences of PLA, Changchun 130062, China; 4. Environmental Science Research Center/Key laboratory for Marine Environmental Science, Xiamen University, Xiamen 361005, China
Abstract:
Keywords:Fusobacterium necrophorum  lkt  BSBSE  cloning  expression
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