早熟禾ISSR反应体系的优化 |
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引用本文: | 刘美,赵桂琴,刘欢,张婷婷,尹国丽.早熟禾ISSR反应体系的优化[J].中国草地学报,2009,31(5). |
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作者姓名: | 刘美 赵桂琴 刘欢 张婷婷 尹国丽 |
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作者单位: | 甘肃农业大学草业学院,甘肃,兰州,730070 |
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基金项目: | 甘肃省自然基金,农业行业专项,科技支撑项目 |
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摘 要: | 以早熟禾基因组DNA为模板.利用正交设计,对影响ISSR反应体系的主要因素(Mg2+、dNTP、Taq酶)从4个水平上进行筛选和优化,建立了适合早熟禾的最佳ISSR反应体系:25μl反应体系中1.25U Taq酶、1.5mmol/L Mg2+,10×PCR Buffer 2.5μl、0.4 mmol/L dNTP、1μl引物、1μl DNA模板.扩增程序为:94℃预变性3min;94℃变性30s,56.4℃退火30s,72℃延伸1min,循环35次;72℃延伸7min,4℃保存.在此反应体系下,可以得到重复性好、稳定且多态性高的条带.
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关 键 词: | 早熟禾 正交优化 |
Optimization of ISSR Amplification System in Poa L. |
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Abstract: | |
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Keywords: | ISSR |
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