鉴别犬瘟热病毒野毒株与疫苗株双重一步法RT-PCR检测方法的建立与应用 |
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引用本文: | 梅胜尧,张玉堂,张逸民,孙宝海,刘晶.鉴别犬瘟热病毒野毒株与疫苗株双重一步法RT-PCR检测方法的建立与应用[J].黑龙江畜牧兽医,2022(8):75-81. |
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作者姓名: | 梅胜尧 张玉堂 张逸民 孙宝海 刘晶 |
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作者单位: | 江苏省药物研究所有限公司江苏省药物安全性评价中心 |
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摘 要: | 为了建立一种简单、快速鉴别检测犬瘟热病毒(CDV)野毒株与疫苗株的方法,试验根据GenBank中CDV野毒株与疫苗株H基因序列设计鉴别检测引物,建立鉴别CDV野毒株与疫苗株一步法RT-PCR,并验证该方法的特异性、敏感性、重复性及符合性;利用建立的鉴别CDV野毒株与疫苗株双重一步法RT-PCR检测方法对2017—2020年采集于江苏省11个不同地市的505份发病犬喉拭子样品和病料样品进行检测,确定CDV野毒株与疫苗株双重一步法RT-PCR的临床适用性。结果表明:该方法对CDV野毒株、CDV疫苗株、CDV野毒株/疫苗株可分别扩增出477 bp、677 bp、477 bp/677 bp的特异性条带,而检测犬细小病毒(CPV)、犬腺病毒(CAV)、犬副流感病毒(CPIV)、犬冠状病毒(CCV)均为阴性;该方法的检测灵敏度为23.1 pg RNA;与RFLP方法的符合率为100%;批内重复性检测和批间重复性检测的结果完全一致;利用该方法检测505份临床样品,CDV野毒株和疫苗株的阳性率分别为8.91%和72.48%。说明建立的鉴别CDV野毒株与疫苗株一步法RT-PCR检测方法具有良好的特异性、...
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关 键 词: | 犬瘟热病毒 野毒株 疫苗株 一步法RT-PCR 检测方法 应用 |
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