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鉴别犬瘟热病毒野毒株与疫苗株双重一步法RT-PCR检测方法的建立与应用
引用本文:梅胜尧,张玉堂,张逸民,孙宝海,刘晶.鉴别犬瘟热病毒野毒株与疫苗株双重一步法RT-PCR检测方法的建立与应用[J].黑龙江畜牧兽医,2022(8):75-81.
作者姓名:梅胜尧  张玉堂  张逸民  孙宝海  刘晶
作者单位:江苏省药物研究所有限公司江苏省药物安全性评价中心
摘    要:为了建立一种简单、快速鉴别检测犬瘟热病毒(CDV)野毒株与疫苗株的方法,试验根据GenBank中CDV野毒株与疫苗株H基因序列设计鉴别检测引物,建立鉴别CDV野毒株与疫苗株一步法RT-PCR,并验证该方法的特异性、敏感性、重复性及符合性;利用建立的鉴别CDV野毒株与疫苗株双重一步法RT-PCR检测方法对2017—2020年采集于江苏省11个不同地市的505份发病犬喉拭子样品和病料样品进行检测,确定CDV野毒株与疫苗株双重一步法RT-PCR的临床适用性。结果表明:该方法对CDV野毒株、CDV疫苗株、CDV野毒株/疫苗株可分别扩增出477 bp、677 bp、477 bp/677 bp的特异性条带,而检测犬细小病毒(CPV)、犬腺病毒(CAV)、犬副流感病毒(CPIV)、犬冠状病毒(CCV)均为阴性;该方法的检测灵敏度为23.1 pg RNA;与RFLP方法的符合率为100%;批内重复性检测和批间重复性检测的结果完全一致;利用该方法检测505份临床样品,CDV野毒株和疫苗株的阳性率分别为8.91%和72.48%。说明建立的鉴别CDV野毒株与疫苗株一步法RT-PCR检测方法具有良好的特异性、...

关 键 词:犬瘟热病毒  野毒株  疫苗株  一步法RT-PCR  检测方法  应用
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