| 水禽核糖体蛋白S12与番鸭细小病毒结构蛋白VP1的体外相互作用研究 |
| |
| 引用本文： | 谢鹏宇,孙婉姝,于天飞,李静,尹海畅,黎明,于志丹.水禽核糖体蛋白S12与番鸭细小病毒结构蛋白VP1的体外相互作用研究[J].黑龙江畜牧兽医,2022(7):81-85. |
| |
| 作者姓名： | 谢鹏宇 孙婉姝 于天飞 李静 尹海畅 黎明 于志丹 |
| |
| 作者单位： | 1. 齐齐哈尔大学生命科学与农林学院;3. 齐齐哈尔大学计算机与控制工程学院 |
| |
| 基金项目： | 黑龙江省自然科学基金项目(LH2020C110)； |
| |
| 摘 要： | 为了探讨水禽核糖体蛋白S12(ribosomal protein S12,RPS12)与番鸭细小病毒(Muscovy duck parvovirus, MDPV)结构蛋白VP1之间的相互作用关系，试验根据GenBank中已登录的北京鸭和浙东白鹅RPS12基因序列，人工合成重组质粒pUC57-DRPS12和pUC57-GRPS12,双酶切后回收目的片段，分别插到载体pGEX-6P-1中，构建重组质粒pGEX-DRPS12和pGEX-GRPS12。将pGEX-DRPS12、pGEX-GRPS12及含MDPV YL08株VP1基因的重组质粒pET-VP1分别转化至大肠杆菌Rosetta(DE3)感受态细胞中，IPTG诱导表达，利用HRP标记的GST或His标签单克隆抗体，通过Western-blot法鉴定重组蛋白，采用GST pull-down法体外检测水禽RPS12蛋白与VP1蛋白的相互作用情况。结果表明：获得的重组蛋白GST-DRPS12、GST-GRPS12和TRX-VP1分子质量分别为41.2,40.3,98.8 ku,浓度为1.32,1.29,0.81 mg/mL;重组蛋白TRX-...
|
| 关 键 词： | 番鸭细小病毒 核糖体蛋白S12 结构蛋白 原核表达 GST pull-down |
|
|
