重组鸡α-干扰素的表达与抗病毒活性分析 |
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引用本文: | 刘莉,王永娟,武彩红,崔平福,谭菊,张成兰,郑天.重组鸡α-干扰素的表达与抗病毒活性分析[J].黑龙江畜牧兽医,2022(22):80-83. |
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作者姓名: | 刘莉 王永娟 武彩红 崔平福 谭菊 张成兰 郑天 |
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作者单位: | 1. 江苏农牧科技职业学院;2. 泰州海关 |
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摘 要: | 为了表达具有抗病毒活性的重组鸡α-干扰素(IFN-α),试验根据大肠杆菌密码子的偏好性,对鸡IFN-α的成熟肽基因序列进行优化,合成后连接至原核表达载体pET30a-ELP,经体外诱导后表达重组蛋白ELP-ChIFN-α,借助重复可逆相变循环(ITC)法进行纯化;纯化蛋白经过变性、复性处理后进行安全性评价,采用微量细胞病变抑制法在犬肾细胞(MDCK)/水疱性口炎病毒(VSV)系统中进行蛋白抗病毒活性的检测。结果表明:合成的重组鸡IFN-α成熟肽基因能在原核表达系统中成功表达;不同浓度的重组蛋白ELP-ChIFN-α对细胞的生长抑制率为0;重组蛋白ELP-ChIFN-α在MDCK/VSV系统中具有抗病毒活性,活性为1.2×106 IU/mg。说明原核表达的重组鸡IFN-α有较好的抗病毒活性,可作为鸡的抗病毒生物药物进一步开发研究。
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关 键 词: | 鸡 α-干扰素 原核表达 类弹性蛋白 抗病毒活性 |
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