| 红螯螯虾卵黄蛋白原N端结构域的生物信息学分析与蛋白的表达鉴定 |
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| 引用本文： | 黄立斌,武霞,王瑞,周明瑞,黄光华,黄黎明,吕敏,黄峥,杨慧赞.红螯螯虾卵黄蛋白原N端结构域的生物信息学分析与蛋白的表达鉴定[J].黑龙江畜牧兽医,2022(10):120-127+136-137. |
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| 作者姓名： | 黄立斌 武霞 王瑞 周明瑞 黄光华 黄黎明 吕敏 黄峥 杨慧赞 |
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| 作者单位： | 1. 广西壮族自治区水产科学研究院广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室;2. 广西师范大学生命科学学院 |
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| 摘 要： | 为研究红螯螯虾(Cherax quadricarinatus)卵黄蛋白原N端结构域(vitellogenin N domain, VitN)的生物学功能并获得具有免疫特异性的红螯螯虾VitN融合蛋白，试验根据红螯螯虾卵黄蛋白原的mRNA序列(GenBank登录号为AF306784.1)获得VitN mRNA序列(编码第42～585位氨基酸),通过在线分析工具对红螯螯虾VitN进行生物信息学分析，并优化合成红螯螯虾VitN基因序列，构建重组表达质粒pET-28a-VitN,将其转化至大肠杆菌BL21(λDE3)感受态细胞中，经IPTG诱导，对红螯螯虾VitN融合蛋白进行表达、纯化、包涵体复性、Western-blot鉴定和浓度测定。结果表明：编码红螯螯虾VitN的氨基酸共544个，均为常见氨基酸，其中丙氨酸、缬氨酸和丝氨酸含量较多(占比分别为7.72%、7.72%和7.54%),色氨酸含量最少(仅占0.92%);红螯螯虾VitN的相对分子质量为64 681,理论等电点为8.69,共含有8 540个原子，分子式为C2671H4260N7...
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| 关 键 词： | 卵黄蛋白原 N端结构域 生物信息学分析 原核表达 分离纯化 |
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