BHK-21悬浮细胞培养条件筛选及口蹄疫病毒悬浮培养工艺研究

为了实现在幼地鼠肾细胞(BHK-21细胞)低血清全悬浮培养工艺下获得更高含量的口蹄疫病毒(FMDV),试验对比了4株不同来源的BHK-21悬浮细胞的培养特性，按体积1%、2%和5%分别接种O型、A型FMDV,接种后4,8,12,16,20,24小时取样进行146S、半数致死量(LD₅₀)对比研究，筛选形态良好、培养特性更稳定的BHK-21悬浮细胞株；以摇瓶悬浮培养筛选得到的BHK-21悬浮细胞株，使用O型FMDV O/HB/HK/99株、A型FMDV AF/72株，从接种剂量、活细胞密度(VCD)、病毒培养温度、病毒培养pH值、换液体积比例等工艺参数对病毒146S表达的影响进行了研究，并在7.5,50,500 L生物反应器中逐级放大，进行了O型FMDV O/HB/HK/99株、A型FMDV AF/72株各3个批次病毒液悬浮培养研究，确定O型FMDV O/HB/HK/99株、A型FMDV AF/72株接种BHK-21悬浮细胞的培养工艺。结果表明：筛选得到1株形态良好、培养特性更稳定的BHK-21-CP005悬浮细胞株；O型FMDV O/HB/HK/99株、A型FMD...