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经改造的猪IGF-Ⅰ基因在巴斯德毕赤酵母中的分泌表达
引用本文:陈苗,伍晓雄,商汉桥,戴汉川,刘红林,李奎. 经改造的猪IGF-Ⅰ基因在巴斯德毕赤酵母中的分泌表达[J]. 农业生物技术学报, 2007, 15(2): 217-221
作者姓名:陈苗  伍晓雄  商汉桥  戴汉川  刘红林  李奎
作者单位:1. 南京农业大学动物科技学院,南京,210095
2. 华中农业大学动物医学院,武汉,430070
3. 华中农业大学水产学院,武汉,430070
4. 中国农业科学院畜牧研究所,北京,100094
基金项目:国家重点基础研究发展计划(973计划)
摘    要:采用酵母偏爱密码子合成5条编码猪胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)基因的引物,利用重叠PCR技术获得含210bp猪IGF-Ⅰ成熟蛋白基因的拼接产物。将该基因插入分泌表达载体pPIC9K中,转化巴斯德毕赤酵母菌(Pischia pastoris)。经表型鉴定、PCR分析及G418筛选得到Muts型多拷贝整合菌,以1.5%甲醇诱导培养后,经SDS-PAGE检测表达产物,在7.5kD处出现一特异蛋白条带,目的蛋白表达量达410mg/L。Dot blot检测表明,重组蛋白可与抗IGF-Ⅰ多克隆抗体反应。

关 键 词:猪胰岛素样生长因子Ⅰ  酵母偏爱密码子  毕赤酵母  分泌表达
文章编号:1006-1304(2007)02-0217-05
收稿时间:2006-06-27
修稿时间:2006-09-22

Secretory Expression of Reconstructed Porcine Insulin-like Growth Factor Ⅰ in Pischia pastoris
CHEN Miao,WU Xiao-xiong,SHANG Han-qiao,DAI Han-chuan,LIU Hong-lin,LI Kui. Secretory Expression of Reconstructed Porcine Insulin-like Growth Factor Ⅰ in Pischia pastoris[J]. Journal of Agricultural Biotechnology, 2007, 15(2): 217-221
Authors:CHEN Miao  WU Xiao-xiong  SHANG Han-qiao  DAI Han-chuan  LIU Hong-lin  LI Kui
Affiliation:1. College of Animal Science and Teclmology, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China; 2. College of Veterinary Medicine, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, China;3. College of Fishery, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, China;4. Institute of Animal Sciences, China Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100094, China
Abstract:
Keywords:porcine insulin-like growth factor I  yeast biased codons  Pischia pastoris  secretory expression
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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